El péptido endógeno Uroguanilyn (UGN) modifica la secreción neta de fluido vía la isoforma NHE2 del intercambiador Na-H en las células T84 de intestino humano

R TORIANO; C POLLAK; MA CURTO; M . PARISI; C . CAPURRO

MAR DEL PLATA, ARGENTINA

Congreso; LIII REUNION ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIONES CLINICAS (SAIC); 2008

  El UGN es un péptido endógeno, análogo de la toxina STa, que interviene en la regulación del transporte de fluido a través del epitelio intestinal y se propone como un eje de unión exocrina entre intestino y riñón para el mantenimiento de la homeostasis de sodio y agua en el compartimiento corporal. Se ha reportado que la unión de UGN con el receptor apical guanilato ciclasa C (RG-C) incrementa los niveles intracelulares de GMPc, aumenta la secreción de Cl- y disminuye la absorción de Na+. Sin embargo no han sido elucidados ni el mecanismo ni los transportadores de Na+ involucrados en este proceso. Utilizando células T84, nosotros demostramos previamente que la unión de STa con RG-C provocaba un aumento del flujo neto secretor de fluido y que una  parte sustancial de este fluido se asociaba a un transporte de soluto no electrogénico.  Recientemente pudimos demostrar, mediante técnicas de RT-PCR, western blot y espectrofluorometría, que T84 expresa en la membrana apical NHE2 y en la basolateral NHE1 y NHE4, todas isoformas del intercambiador Na+/H+. Los experimentos funcionales nos permitieron concluir que NHE1 y 4 son responsables del mantenimiento del pHi mientras que NHE2 juega un rol en la absorción de Na+. La actividad de NHE2 se vio inhibida frente a la estimulación apical con UGN, retrasándose la recuperación del pHi frente a la imposición de un pulso ácido. Además, en condiciones basales UGN fue capaz de inducir sendos aumentos del pHi y del flujo neto secretor de fluido sin cambios en la corriente de cortocircuito, indicando un proceso eléctricamente silente. Para evaluar si el intermediario de esta respuesta era el GMPc, estudiamos el efecto de un análogo permeable del mismo, 8-Br-GMPc, sobre los parámetros de interés en condiciones basales. Los resultados obtenidos indican que UGN aumenta el flujo neto secretor transepitelial de fluido en T84, disminuyendo la componente absortiva del mismo por medio de la inhibición de la absorción de Na+ a través de NHE2.