Efecto del flujo luminal sobre la respuesta reguladora de volumen en células renales.

PIZZONI A; JUAN FERNADEZ; GISELA DI GIUSTO; V. RIVAROLA; C. CAPURRO; PAULA FORD

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2012

Durante  la  transición de  la diuresis a  la antidiuresis  las células de  los  túbulos colectores  (TC) del  riñón de mamífero están expuestas a cambios del gradiente osmótico y modIFIcaciones del Fujo tubular. En el estado la antidiuresis la acción de la hormona vasopresina induce la incorporación de la acuaporina 2 (AQP2) a la membrana apical provocando una importante reabsorción de agua desde la luz al intersticio. Este movimiento de agua implica cambios en el volumen celular y en la activación de mecanismos de  regulación de volumen. Previamente, describimos en  células renales, que  la presencia de AQP2  facilita  la entrada de Ca2+, necesaria para la activación de los mecanismos rápidos de regulación del volumen celular en respuesta a un shock hipotónico (RVD) (Galizia et al, 2008). Además informamos la existencia de una interacción funcional entre el canal de calcio TRPV4 (Transient Receptor Potencial Vanilloid 4) y AQP2 que involucra  la  translocación del TRPV4 a  la membrana plasmática  (Galizia et al, 2012). Todos estos experimentos se realizaron en ausencia de Fujo luminal. Con el objetivo de estudiar si la respuesta reguladora de volumen en  células  renales que  expresan o no AQP2  (AQP2-RCCD1, WT-RCCD1), se modi%ca en presencia de un 'ujo luminal (situación más cercana a la fIsiológica) perfundimos  las  células  con  una  solución  hipotónica  (4 ml/min; 200 mOsM). Encontramos que tanto en las células WT como en las AQP2-RCCD1 existe un aumento de la respuesta reguladora de volumen (% RVDF) en  comparación  con experimentos  realizados en ausencia de perfusión (% RVDNF) (% RVDNF-WT: 15.7 ± 1.1 vs % RVDF-WT: 69.4 ± 4.5, p < 0.01; % RVDNF-AQP2: 38.2 ± 1.06 vs % RVDF-AQP2: 66.5 ± 4.80, p < 0.01). Para investigar si este aumento se debía a una activación del TRPV4 estudiamos en las mismas condiciones los cambios en la concentración intracelular de calcio. Los resultados no mostraron diferencias significativas en las células WT y solo se observó un pequeño aumento en los niveles de calcio en las células que expresan AQP2. Por lo tanto podemos concluir que  la perfusión  aumentó  el RVD  independientemente de  la  expresión de AQP2 por un mecanismo que no involucra al TRPV4. El aumento de la actividad de los mecanismos reguladores de volumen podría deberse a la activación de una vía estimulada por 'ujo no dependiente de calcio o por efecto de la modi%cación de la fuerza impulsora.