Mecanismos reguladores de volumen implicados en el aumento de la proliferación de células renales que expresan AQP2

PILAR FLAMENCO; GISELA DI GIUSTO; VALERIA RIVAROLA; JUAN FERNÁNDEZ; PAULA FORD ; CLAUDIA CAPURRO

Congreso; 55 Reunión anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2010

Hasta hace poco tiempo los cambios en el volumen celular observados durante la proliferación eran considerados un fenómeno de poca importancia, sin embargo, creciente evidencia muestra que dichos cambios y la activación de mecanismos de transporte iónicos sensibles a volumen, son todos ellos necesarios para una adecuada proliferación celular. No obstante, el vínculo entre estos cambios de volumen y la participación de los canales de agua (acuaporinas, AQPs) no había sido investigado. Nuestros estudios previos mostraron una asociación entre la presencia de AQP2 y la activación de canales reguladores de volumen tanto frente a un shock hipotónico o a un estímulo apoptótico. El objetivo de este trabajo fue estudiar si el incremento de la proliferación, previamente observado en presencia de AQP2, está asociado a la activación diferencial de mecanismos reguladores de volumen. Utilizamos dos líneas celulares de túbulo colector cortical con características bien definidas: WT-RCCD1 la cual no expresa AQPs y AQP2-RCCD1 que expresa constitutivamente AQP2 en la membrana apical, y se realizaron estudios a nivel funcional y molecular. Los resultados muestran que la tasa de proliferación que está aumentada en presencia de AQP2 (%BrdU+, WT vs. AQP2: 19,4 +/- 2,7 vs. 36 +/- 4.2, n=8, p<0.01) disminuye luego de la incubación con BaCl2, inhibidor de canales de K+ reguladores de volumen (%BrdU+, WT vs. AQP2: 20,6 +/-  1.86 vs. 11 +/- 1.9, n=3, p<0.01). Además, el inhibidor produjo un aumento significativo en el % de células en fase G0/G1 y una disminución en fase G2/M en paralelo con una reducción en la actividad reguladora de volumen, sólo en células que expresan AQP2. Asimismo, la inhibición de los canales de Ca+2, responsables de la activación de estos mecanismos, disminuye la proliferación sólo en presencia de AQP2. Concluimos que el aumento de la proliferación observado dado por la expresión de AQP2 está asociado a la activación de canales de K+ reguladores de volumen.