La interacción de microcina J25 con interfases fosfolipídicas induce cambios en el entorno de sus tirosinas

BELLOMIO, AUGUSTO; CURTO, LUCRECIA; ARCURI, BEATRIZ FERNANDEZ DE; MAGGIO, BRUNO; DELFINO, JOSÉ M.; MORERO, ROBERTO D.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; Sociedad Argentina de Biofísica, XXXIII Reunión Anual, Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas de la Argentina; 2004

Sociedades Biomédicas de la Argentina, Sociedad Argentina de Biofísica

Microcina J25 (MccJ25) es un péptido antimicrobiano de 21 residuos de aminoácidos [G(1)-G-A-G-H(5)-V-P-E-Y-F(10)-V-G-I-G-T(15)-P-I-S-F-Y(20)-G] y con una estructura tridimensional inusual. El extremo N-terminal forma una unión amida con el carboxilo-gamma del Glu8, generándose un anillo de 8 residuos. La cola (Tyr9 a Gly21) se pliega sobre si misma para enhebrarse dentro del anillo, formando una horquilla ß. Las cadenas laterales aromáticas de Phe19 y Tyr20 traban la estructura impidiendo que el extremo C-terminal salga del anillo. Termolisina hidroliza las uniones entre Phe10 y Val11 y entre Gly12 e Ile13 obteniéndose un análogo de dos cadenas (MccJ25-Th19). Su estructura tridimensional determinada por RMN reveló que la región del anillo y de la cola C-terminal es idéntica a la de MccJ25. MccJ25-Th19 conserva la capacidad de inhibición de la RNA polimerasa en E. coli y de la respiración en Salmonella.En esta comunicación se presentan estudios de la interacción de MccJ25 y de MccJ25-Th19 con micelas mixtas de PC de yema de huevo (PC) y detergente (C12E10) y con capas monomoleculares de fosfolípidos. Los espectros de CD de los péptidos en la zona del UV-cercano pero no en la zona del lejano, realizados en presencia de micelas mixtas, presentan cambios que podrían interpretarse en términos de modificaciones en el micro-entorno de los aminoácidos aromáticos. Este resultado se correlaciona con los cambios observados en la fluorescencia intrínseca de los péptidos en presencia de las micelas y de SUV de PC. Los experimentos de monocapas revelaron que ambos análogos son capaces de penetrar en monocapas de PC y de fosfolípidos extraídos de E. coli a presiones comparables con las que existen en las membranas biológicas. Los resultados obtenidos indicarían que MccJ25 y MccJ25-Th19 interaccionan con interfases fosfolipídicas de manera similar. Las tirosinas podrían estar involucradas en el proceso.