LA GLICOSILACIÓN DIFERENCIAL REGULA LA SOBREVIDA DE LINFOCITOS TH1/TH2 HUMANOS

TOSCANO M; ILARREGUI JM; RUBINSTEIN N; BIANCO G; FAINBOIM L; ZWIRNER N; RABINOVICH G

MAR DEL PLATA

Congreso; CONGRESO CONJUNTO DE SOCIEDADES BIOMEDICAS; 2004

Soc. Argentina de Investigación Clínica, Soc. Argentina de Inmunología, Asoc. Argentina de Farmacología Experimental, Soc. Argentina de Neuroquímica, Soc. Argentina de Biofísica, Soc. Argentina de Fisiología, Soc. Argentina de Biología

Recientemente hemos demostrado, en diferentes modelos experimentales, que Gal-1 es capaz de inducir un desvío de la repuesta inmune hacia un perfil Th2 y que linfocitos Th2 polarizados in vitro son resistentes a la apoptosis inducida por Gal-1. El objetivo del presente trabajo fue investigar los mecanismos moleculares que regulan la susceptibilidad diferencial de linfocitos Th1/Th2 a la apoptosis inducida por Gal-1. A tal fin linfocitos CD4+ fueron activados con PHA e IL-2 y cultivados por 5 días en condiciones polarizantes Th1 (IL-12; anti-IL-4) o Th2 (IL-4; anti- IL-12). Se analizó la unión de Gal-1 a dichas células y se observó que linfocitos Th2 unen Gal-1 en menor grado que linfocitos Th1 (p<0,05). Posteriormente se estudió el estado de glicosilación de linfocitos Th1 y Th2 utilizando lectinas vegetales biotiniladas (SNA, MAA y PNA) y un AcMo anti-core-2-O-glicanos (1D4). Se observó que linfocitos Th2 presentan un incremento de ácido siálico (AS) en posición alfa2,6 en N-glicanos y alfa2,3 en core- 1-O-glicanos respecto a linfocitos Th1 (p<0,05). Utilizando ensayos de Western blot se observó un incremento de la enzima ST6Gal I, responsable de la adición de AS alfa2,6 a N-glicanos, en células Th2. Para demostrar una relación causal entre la sialilación y la resistencia a la apoptosis inducida por Gal-1, las células fueron tratadas con sialidasas específicas y se observó que la remoción de AS alfa2,6 de linfocitos Th2 provoca un aumento de la unión de Gal-1 y un incremento en la apoptosis inducida por esta proteína (p<0,05). Finalmente se demostró que el aumento de AS alfa2,6 en linfocitos Th2 requiere de la activación celular y la presencia de IL-4. A su vez se determinó que este fenómeno depende de la activación de las quinasas JAK2/3 y ERK. Este trabajo provee evidencias de un nuevo mecanismo, basado en la glicosilación diferencial, a través del cual es posible modular la sobrevida de linfocitos Th1/Th2 con las consecuentes implicancias en la homeostasis de la respuesta inmune