INVESTIGADORES
VENTURINO Andres
congresos y reuniones científicas
Título:
Capacidad crioprotectora de diluyentes hipertónicos sobre semen de carnero congelado- descongelado: niveles de glutatión y peróxidos
Autor/es:
QUINTANA M.M; MEDINA V.H; AISEN E.G; VENTURINO A
Lugar:
Mendoza
Reunión:
Congreso; XXXIV Reunión Anual de la SAIB; 1998
Institución organizadora:
SAIB
Resumen:
La inseminación artificial por
vía cervical en ovinos ha requerido el desarrollo de criopreservadores
adecuados, ya que los diluyentes empleados en bovinos han dado bajos
rendimientos. En nuestro laboratorio hemos desarrollado, con buenos resultados,
crioprotectores hipertónicos en base a trealosa. Presentamos los resultados de
protección al descongelado y termorresistencia a 39°C del diluyente isotónico
base (B) de Salamon, y dos hipertónicos con 110 mOsm trealosa sola (T) o con
EDTA 2.5 mM
(TE). Evaluamos motilidad individual e integridad acrosomal por microscopía de
contraste de fase. Medimos glutatión reducido (GSH) y total (GSH+GSSG) en
espermatozoide y medio de descongelado, y peróxidos en extracto lipidico. T y
TE ptesentaron una motilidad individual significativamente mayor que B al
descongelado (67% vs 58%) y luego de 4 h de termorresistencia (37% vs 25%),
mientras que a 9 h sólo hubo motilidad en TE (35%). La integridad acrosomal fue
semejante para los 3 diluyentes al descongelado, mientras que a las 4 h a 39°C se obtuvo TE>T>B
(61, 44 y 33% respectivamente). GSH en espermatozoide fue un 13% mayor para T y
TE respecto a B al descongelado, y un 47% mayor luego de 3 h. No se observaron
diferencias significativas en el GSH extracelular. El contenido de GSH+GSSG fue
similar para los 3 diluyentes. La producción de peróxidos fue muy variable entre
muestras, sin observarse diferencias significativas. Adjudicamos la capacidad
crioprotectora de trealosa a su capacidad deshidratante y a su interacción con
la membrana. La acción de EDTA estaría relacionada con la remoción de Ca2+, que
puede competir con trealosa en su unión a la membrana, y es esencial para
desencadenar la reacción acrosomal. El consumo de GSH en ausencia de trealosa
puede estar relacionado a una mayor liberación de especies reactivas de oxígeno
(ROS), con oxidación a GSSG. Los resultados preliminares de producción de
peróxidos sugieren que el GSH puede evitar el daño de membranas por ROS en las
condiciones indicadas hasta las 3 h.