LA ACTIVIDAD DE LA CATEPSINA-L EN LOS PRECURSORES HEMATOPOYÉTICOS Y EN LAS CÉLULAS ESTROMALES DE LA MEDULA ÓSEA REGULA LA PRODUCCIÓN DE LINFOCITOS B

BADANO N; MAGLIOCO A; MACHUCA D; COSTA H; CAMERANO G; PIAZZON I; NEPOMNASCHY I

Congreso; 60° Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2012

Utilizando ratones CTSLnkt/nkt (nkt) portadores de una deleción inactivante en el gen de la catepsina-L (CTSL), estudiamos la influencia de la CTSL sobre la homeostasis de las poblaciones linfoides B. Nuestros resultados indicaron que el número de células B en los ganglios linfáticos y bazo de los ratones nkt está aumentado y que dicho incremento no está asociado a alteraciones en la proliferación/apoptosis sino con una mayor producción de células B por la medula ósea (MO). Además, el número de células B transicionales (BT) del bazo (B220+HSAhi) -células B que han emigrado recientemente de MO- está aumentado, correlacionando con una mayor exportación de células B de la MO nkt al bazo. Para estudiar la contribución de las células hematopoyéticas (CH) y de las células estromales (CE) de la MO en la mayor producción de células B, realizamos ensayos de unidades formadoras de colonias (UFC) luego de un co-cultivo entre las mismas. En presencia de CEwt, las CHnkt produjeron un mayor número de colonias con respecto a las CHwt (media UFC±DS: 146±11 CHnkt vs 67±8 CHwt; n=3; p menor 0,01). Además, el número de colonias derivadas de CHwt fue mayor luego del co-cultivo con CEnkt (media UFC±DS: 115±11 CEnkt vs 67±8 CEwt; n=3; p menor 0,01). El mayor número de colonias se obtuvo luego del co-cultivo entre CHnkt y CEnkt (media UFC±DS:191±17). Para confirmar la influencia de las CHnkt en el aumento de linfopoyesis B in vivo, trasplantamos células de MO nkt y wt en huéspedes wt irradiados letalmente. A los 12 días observamos mediante FACS, que los ratones trasplantados con CHnkt mostraron mayores niveles de precursores de células B en la MO (media n°céls B220lo/+x106±DS: 4.2±0.8 CHnkt vs 0.9±0.2 CHwt; n=9; p menor 0.005) y mayores niveles de células BT del bazo (media n°céls B220+HSAhix106±DS: 35.5±6.5 CHnkt vs 4±1 CHwt; n=9; p menor 0.001). Estos resultados indican que la ausencia de actividad de CTSL tanto en las CH como en las CE de la MO contribuye al incremento de la linfopoyesis B en los ratones nkt.