La inhibición de la hormona liberadora de tirotrofina diencefalica (TRHd) mediante interferencia por RNA (RNAi) disminuye la hipertensión en el raton agouti.

MARIA SILVINA, LANDA; SILVIA INES, GARCIA; BURGUEÑO ADRIANA,; MARIANO LUIS, SCHUMAN; ALVAREZ AZUCENA,; GEMMA CAROLINA,; CARLOS JOSE, PIROLA

Buenos Aires.

Congreso; XI Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2004

Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial

LaTRHd regula el gasto energético, el apetito y la presión arterial (PA). Su sobreproducción eleva la PA en la rata normal, y participa en la hipertensión de las SHRy ratas obesas. LaTRHd mediaría el efecto hipertensor de la leptina icv. Ahora, estudiamos el efecto de la RNAi (fragmentos de entre 18 a 30 bp de RNA doble cadena) contra el preTRH (TRH-RNAi) y como control negativo, la RNAi contra la proteína fluorescente verde (GFP-RNAi), sobre los niveles de la PAS (método pletismográfico de la cola) y el contenido de TRHd (RIA) en ratones normales (C57BL/6J) y obesos con hiperleptinemia, los Agouti (C57BL/6J-AY). Los agouti tienen elevación de leptina plasmática (ELISA) que correlacionó con el peso corporal (r: 0.98, p<0.01, n=l 6) (tabla) y son hipertensos (agouti: 121±2 mmHg vs controles: 102±2 mmHg, p<0.0001, n=5). La PAS correlacionó con la TRHd (R: 0.56, p<0.01, n=16) teniendo los agouti niveles de TRHd elevados con respecto a los controles (768±65vs 429±59 pg/mg proteina, p<0.001, n=5). Para analizar la relación de la PAS con la TRHd, tratamos a los animales icv (0.5 ug en 5 ul) con TRH-RNAi y GFP-RNAi Sólo el TRHRNAi disminuyó los niveles de TRHd y PAS de los ratones agouti (tabla). Ni el TRH-RNAi ni el GFP-TRHi afectaron estas variables en los ratones controles. Los niveles séricos de las hormonas T3 y T4 (ECLIA) permanecieron inalterados tanto en condiciones basales como después del tratamiento icv (tabla).Variable Controles ( 6BI Agouti GFP-RNAi TRH-RNAi GFP-RNAi TRH-RNAiN 5 5 5 5Peso Corporal, g 32,1±1,9 34,5±1,9 50,1±1,9 * 52,5±1,4Leptina plasmática, pg/ml 72,2±230,5 170±230,6 1844±231 2094±232´PAS, mmHg - 103±2 105±2 129±3 & 106±2 #TRHd pg/mg proteina 495±69 326±69 757±78 & 402±70 #T3, ng/mg 4,46±0 29 4,24±0,26 4 14±0 29 3,56±0,26T4. ug/mg 13±0:08 1 1,04±0,007 1: 1 4±0,07 0,99±0,07ANOVA de dos factores, *: p<0,001 respecto a los controles en la misma condición Media ± ES. & p<0,03 respecto a los controles en la misma condicion , #: p<0,01 respecto a los agouti tratados con GFP-RNAi . Proponemos que la TRHd es importante en la fuerte asociación entre obesidad e hipertensión. El RNAi, es potente y de larga duración para el knocking down de genes in vivo en mamíferos y una eficaz alternativa en terapia génica.