Regulación de la expresión del gen de la TRH por agentes hipertroficos en cultivos de fibroblastos cardíacos de ratas neonatas.

MARIANO LUIS, SCHUMAN; VANESA COPA; MARIA SILVINA, LANDA; ALVAREZ AZUCENA,; CARLOS JOSE, PIROLA; SILVIA INES, GARCIA

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Anual de la sociedad Argentina de Investigación Clínica, LV Reunión de la Sociedad Argentina de Inmunología. Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Fisiologia,; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Describimos por primera vez la presencia de TRH y su receptor de tipo 1 en miocitos y fibroblastos de ratas neonatas. A partir de  Estudios que muestran a los fibroblastos cardiacos (FC) no solo como formadores de la matriz, sino como capaces de transmitir  estimulos directos a miocitos, analizamos si la estimulación por 24 y 72 hs con agentes hipertrofiantes, capaces de estimular la  expresión de TRH en miocitos provocaban efectos a nivel de los  FC. Realizamos cultivos de FC de neonatos de ratas macho  wistar, SHR y WKY estimulados con Fenilefrina (Phe) 1 y 100 uM  Inositol 3P 100 nM (libre de suero - 24hs) y cuantificamos la expresión de TRH y ANP mediante RT-real time PCR a partir del RNA total. Los corazones fueron digeridos con tripsina-colagenasa. Los FC se separaron por gradiente de percoll. La Phe provoco un aumento de la expresión del gen de TRH de 4 veces a las 24 y 72 hs (p< 0,001), asimismo el IP3 provocó un aumento tiempo dependiente (p< 0,03, n= 3). Obtuvimos resultados similares en la expresión del gen de ANP bajo estas mismas condiciones y una correlación significativa con los niveles de la expresión del gen de TRH (r: 0,48 p<0,04). Finalmente analizamos la expresión del gen de TRH bajo estos estimulos en FC de neonatos de SHR vs WKY. Sorprendentemente, en celulas de neonatos (donde aún no son evidentes las alteraciones a nivel cardíaco) encontramos un aumento de casi el 70% en el cultivo de SHR en la condición basal respecto de la WKY (p<0,05). Se observó un aumento de la expresión de TRH con Phe que fue dosis y tiempo dependiente solo en la cepa WKY (p<0,001), sugiriendo una incapacidad de los FC de SHR para responder a estos agentes. Demostramos por primera vez la regulación del gen de la TRH por agentes hipertrofiantes en FC de neonatos. La presencia y regulación de la TRH en FC plantea la posible participación en la fisiopatología cardíaca al estar aumentada en las SHR presentando un comportamiento diferencial frente a las WKY aun en la edad neonata.