Efecto de la TRH sobre cultivos de fibroblastos cardíacos de rata: Acción profibrotica y apoptotica

MARIANO LUIS, SCHUMAN; VANESA COPA; MARIA SILVINA, LANDA; ALVAREZ AZUCENA,; FINKIELMAN SAMUEL,; CARLOS JOSE, PIROLA; SILVIA INES, GARCIA

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Anual de la sociedad Argentina de Investigación Clínica. Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Demostramos que en FC de ratas Wistar macho neonatas, agentes hipertróficos (fenilefrina (Phe) e IP3) aumentan la expresión de TRH y ANP y la estimulación con TRH aumenta la expresión de BMHC y ANP. Decidimos analizar la participación de la TRH en fenómenos involucrados en la patología cardiaca como la fibrosis y apoptosis. Evaluamos la expresión del gen de colágeno III y la relación de los genes proapoptotico/antiapoptotico (Bax/Bcl2) por RT-PCR en tiempo real. Encontramos que la estimulación de cultivos de FC con TRH aumento en forma dosis dependiente la expresión de colágeno III (Z4h, Cont: 0,075 +/-0,017 vs 1iM:0,125+/-0,017, 10iM:0,160+/-0,017) alcanzando plateau a las 48hs (n=4, p<0,02) sugiriendo su acción profibrotica. Además, provocó un aumento de Bax/bcl2 (48h, Cont: 100% vs 1uM:140%; 10iM:142%) que permaneció hasta las 72hs (n= 6; p< 0,04) indicando un aumento de la actividad apoptotica de estas células. Mas aun, la estimulación con un agente cardiotoxico proapoptotico (Doxorrubicina 1001M) aumento la expresión de TRH en un 80% vs control (n=3, p<0,02). La All, promotor de ambos procesos (1-10uM ), no provocó diferencias en la expresión de TRH descartando su participación en esta vía. Datos preliminares muestran un comportamiento diferencial en los FC de hembras dado que existe un aumento en el gen de TRH comparadas con machos en condición basal y no observamos efecto al estimularlas con Phe o IP3 a las 48hs a diferencia de los FC de machos en los que aumenta su expresión. Por el contrario, la All (1uM) que no produjo cambios en los FC de machos, disminuyo la expresión del gen de TRH a casi un 70% del control (n=6; p<0,04) y no produjo cambios en colágeno III aunque si se observo un aumento de Bax/Bcl2. Demostramos por primera vez la participación de la TRH en los procesos fibroticos y/o apoptóticos de los fibroblastos cardiacos de rata Wistar macho. Los Resultados plantean la necesidad de continuar los estudios diferenciando FC entre machos y hembras.