Análisis fenotípico de sustituciones puntuales de COP1 en diferentes condiciones de luz

CRISTIAN M. ESCUDERO; JAVIER F. BOTTO

Córdoba

Congreso; II Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos; 2013

Grupo Argentino de Fotobiología

COP1 es una proteína altamente conservada con actividad E3 ligasa, que cumple un papel central en la regulación de la fotomorfogénesis en plantas. En oscuridad, COP1 afecta la expresión del 20%, aproximadamente, de los genes de Arabidopsis thaliana, esto es principalmente debido a su relación con la proteólisis de factores de transcripción de la fotomorfogénesis (1). COP1 se caracteriza por tener un dominio un dominio de interacción proteína-proteína denominado WD40. A partir de materiales transgénicos con substituciones puntuales en este dominio queremos indagar acerca de la importancia funcional de cada una de estas regiones en el reconocimiento de los factores de transcripción a interaccionar. Cinco independientes substituciones aminoacídicas en cuatro distintos loops se realizaron sobre COP1 que podrían afectar las interacciones entre las proteínas pero no modifican el empaquetamiento de la proteína (2). A dichas sustituciones puntuales se le realizaron análisis fenotípicos, moleculares y bioquímicos en diferentes condiciones de luz para evaluar su respuesta. Resultados preliminares nos indican que la sustitución #3 posee una mayor sensibilidad a la luz R (rojo), RL (rojo lejano) y A (azul). Además, dicha sustitución, acumula mayor cantidad de antocianinas en luz A y R comparada con el control COP1 sobreexpresante. Evaluando diferentes condiciones de sombreado (SAS) en hipocotilo, observamos que una baja relación de R/RL la sustitución #3 no presenta ningún tipo de respuesta al sombreado, mientras la sustitución #4 presenta una respuesta exagerada. Por otro lado, cuando hay una disminución de la cantidad de azul que percibe el hipocotilo, las sustituciones #1, #4 y #5 presentan una respuesta exagerada comparada con el control. Además, los perfiles de expresión de genes involucrados en respuesta a somberado acompañan a esta respuesta exagerada de las sustituciones. Lo que nos indicaría que regiones de COP1 estarían involucradas en la regulación de los distintos factores de transcripción en respuesta a la SAS.