En busca del subtipo de receptor P2Y que está implicado en la modulación presináptica inducida por nucleótidos de adenina en terminales nerviosas motoras

JUAN GUARRACINO; ALEJANDRO CINALLI; ADRIANA LOSAVIO

Buenos Aires

Jornada; XI Jornadas Científicas del Instituto de Investigaciones Médicas Alfredo Lanari; 2012

Comisión Organizadora Jornadas IDIM 2011

En trabajos anteriores hemos encontrado que, en sinapsis neuromuscular de mamífero, el ATP/ADP induce inhibición presináptica de la liberación del neurotransmisor por activación de receptores de ATP del P2Y12 y/o P2Y13. Dado que ambos receptores tienen un alto grado de identidad aminoacídica y una corta distancia entre los dos genes en el genoma humano y de rata ha sido difícil desarrollar antagonistas específicos para cada uno de ellos. Sin embargo, recientemente se han comercializado antagonistas selectivos para los receptores P2Y12 (MRS-2395) y P2Y13 (MRS-2211). El propósito de este trabajo fue identificar el/los subtipo/s de receptores P2Y responsables de la modulación presináptica inducida por el agonista preferencial de estos receptores, 2-MeSADP (150 nM), a través del estudio de los potenciales sinápticos, en presencia de los antagonistas antes mencionados. Los resultados demuestran que, en preparaciones frénico-diafragma de ratones CF1, 2-MeSADP redujo la amplitud de los potenciales de placa (EPPs) al 54.1 ± 5.5 % (n= 4, p < 0.05) de los valores controles cuando el nervio frénico fue estimulado con pulsos supramáximos, 0.5 Hz y 0.1 ms de duración y que ese efecto modulatorio no fue modificado por el antagonista de los receptores P2Y12 (10 M MRS-2395: 102.2 ± 4.8 %, MRS-2395 + 2-MeSADP: 42.2 ± 5.3 %, p < 0.05). Por el contrario, el antagonista de los receptores P2Y13 (10 M MRS-2211) previno totalmente la inhibición presináptica inducida por 2-MeSADP sobre la liberación evocada de ACh (2-MeSADP: 48.8 ± 4.9 % de los valores controles, n=4, p < 0.05, MRS-2211: 83.3 ± 9.5 %, MRS-2211 + 2-MeSADP: 97.8 ± 3.3 %, p> 0.05). Como P2Y13 es el único receptor de P2Y con alta afinidad para IDP, estudiamos su efecto sobre la liberación espontanea y evocada del neurotransmisor. Encontramos que 100 M IDP redujo tanto la frecuencia de los potenciales de placa miniatura (IDP: 49.8 ± 2.3 % de los valores controles, n= 4, p< 0.05), como la amplitud de los EPPs (IDP: 56.7 ± 9.8 %, n= 3, p < 0.05). Estos resultados sugieren que el efecto modulador del ATP/ADP sobre la secreción del neurotransmisor en sinapsis neuromuscular de mamífero está mediado por el subtipo del receptor de ATP P2Y13.