INGEBI   02650
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN INGENIERIA GENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR "DR. HECTOR N TORRES"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de Marcadores Moleculares de linaje para estudiar tropismo de vector y hospedero en la infeccion por Trypanosoma cruzi.: PCR Inter -Elementos Repetitivos
Autor/es:
: DUFFY, T.; BURGOS, JM.; BISIO, M.; CARDINAL, V., MEJÍA JARAMILLO, AM, LEVIN, MJ; GURTLER, RE.; TRIANA CHAVEZ, O Y SCHIJMAN AG.
Lugar:
La Plata, Argentina
Reunión:
Congreso; I Congreso Panamericano de Zoonosis; 2006
Resumen:
Introduccion: El estudio del polimorfismo genético de T. cruzi es relevante para investigar su rol en el tropismo de hospederos y vectores como en el espectro de manifestaciones de la enfermedad de Chagas. T.cruzi se clasifica en 6 linajes: TC1, TCIIa-e. Aun no existen marcadores moleculares para identificar linajes capaces de discriminar algunas infecciones mixtas. Objetivo: Analizar la distribución genómica diferencial de los elementos repetitivos (RE) SIRE, L1Tc y TcIRE, para explorar estrategias de PCR inter-RE discriminatorias de linaje. Materiales y método: PCR inter-RE consiste en amplificar fragmentos genómicos entre elementos RE contiguos. Se realizaron experiencias de INTERRE con distintas combinaciones de primers: incluyendo siempre un primer para SIRE y otro/s primer/s para SIRE, L1Tc o TcIRE con cepas de referencia y aislamientos de distintos vectores y hospederos. Resultados: Se observó una distribución diferencial de SIRE en los distintos linajes, mientras que L1Tc y TcIRE están homogéneamente distribuidos. Los amplicones diferenciales fueron clonados y secuenciados (TABLA).
Marcador Primers PM Secuencia Discriminación
IS-1 INSF/INSR 600 transialidasa IIe / IIb-IId
IS-2 SIREC/INSR 380 SIRE en tandem IIb / IId-IIe
IS-3 INSR-INSF 200 pseudogen transialidasa IIb / IId-IIe
IS-4 INSR-INSF 520 region subtelomerica IId / I-IIb-IIe
IS-5 INSR-LITcF 900 en procesamiento IIe / IId,
IS-6 INSR-LITcR 230 en procesamiento IIb/ IIe,
IS-7 INSF/INSR 700 en procesamiento I / IIb-IId-IIe
Conclusiones: Estos nuevos marcadores moleculares están en proceso de validación para su incorporación a un algoritmo de identificación de linajes en muestras biológicas infectadas con linajes múltiples.