EFECTOS NO GENOMICOS DE HORMONAS TIROIDEAS (HT): ACTIVACION DEL NF-kB INDUCIDA EN UN LINFOMA T MURINO BW5147 (BW).

ML BARREIRO ARCOS; RN FARÍAS; DM SILBERMAN; AJ KLECHA; AM GENARO; GA CREMASCHI

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; L Reunión Anual de la SAIC; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Previamente demostramos que las isoformas z de la proteína quinasa C (PKC) e inducible de la oxido nitrico sintasa (iNOS) son de crucial importancia para la proliferación de células BW. También comprobamos que las HT estimulan la proliferación de las células BW en forma concentración-dependiente (a las 24 hs de cultivo, T3, 10-9M: 98±9%; T4, 10-7M: 186±15%) y aumentan la expresión de PKCz y de iNOS. El objetivo de este trabajo fue profundizar los mecanismos intracelulares involucrados en los efectos de las HT. La incubación por 15 minutos con HT o por 24 hs con T3-agarosa indujo un incremento menor de la respuesta proliferativa celular (T3-agarosa, 10-9M: 32±5%, p<0.01). T3-agarosa, al igual que T4 y T3, indujo una rápida (5 minutos) traslocación de PKC a la membrana celular tal como se determinó por fosforilación del sustrato específico MBP[4-14]. También se observó la degradación del IkB (determinada después de 15 min por Western blot a partir de extractos citosólicos) y la consecuente traslocación de NF-kB al núcleo (determinado por EMSA). La T3-agarosa, a diferencia de las HT, no fue capaz de inducir el aumento de la expresión proteica y genómica de iNOS. El inhibidor de PKC, staurosporina bloqueó la traslocación mediada por HT del NF-kB al núcleo e inhibió la expresión genómica y proteica de la iNOS, como fuera observado por RT-PCR y Western blot respectivamente. El tratamiento de las células BW con el pseudopeptido miristoilado de PKCz inhibió la proliferación celular inducida por HT, la traslocación de NF-kB al núcleo y disminuyó la actividad de NOS (medida por formación de [14C]-citrulina). Dado que la T3-agarosa no puede atravesar la membrana celular se puede concluir que los efectos de las HT sobre la modulación del crecimiento celular, a través de la inducción de la expresión genómica y proteica de iNOS observados previamente, incluyen la participación de la activación no genómica de PKC y NF-kB.