Determinación de la estructura y procesamiento del locus ribosomal de Trypanosoma cruzi

CAMARA MM; BOUVIER LA; MARTINEZ SAYE M; MIRANDA MR; PEREIRA CA

Congreso; XXV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2012

Trypanosoma cruzi y Trypanosoma brucei presentan los genes ribosomales organizados en tándem en múltiples grupos ubicados en distintos cromosomas como en el resto de los organismos. El ARNr ribosomal es sintetizado por la RNA polimerasa I como un precursor 35S que luego es procesado. El ARNr 5S es transcripto fuera del nucleolo por la RNA polimerasa III. En tripanosomátidos el 28S presenta una estructura atípica, en T. brucei se ha determinado que se encuentra dividido en seis fragmentos. El resto delos ARNr presentan una disposición similar al resto de los eucariotas. En T. cruzi no se conoce la estructura del locus ribosomal ya que aún no fue correctamente ensamblado debido al alto contenido de secuencias repetitivas que reveló la secuenciación de los genomas. Tampoco existen datos acerca del procesamiento del ribosoma tanto a nivel de las proteínas que participan como de los precursores de los distintos ARNr. En el presente trabajo, secuenciamos completamente el locus ribosomal de la cepa Y y de la cepa CL Brener. Encontramos que el locus ribosomal presenta alrededor de 16 kb, presentando una estructura de tipo promotor ribosomal, 18S, 5,8S y 7 28S, 28S alfa, 28S beta, 28S beta2, 28S gama, 28S ipsilon,28S phi y 28S tita en vez de seis como en T. brucei . Pudimos encontrar grandes diferencias entre ambas cepas, en particular en las regiones espaciadoras que podrían ser capitalizadas como herramientas de genotipificación. Por otra parte comenzamos con el estudio del procesamiento del locus ribosomal, encontramos todos los precursores del 18S, y pudimos determinar que presenta mayor similitud con el procesamiento del ribosoma en mamíferos que con levaduras. Finalmente determinamos la secuencia del terminador ribosomal, la cual presenta una gran divergencia con otros eucariotas.