VARIACIONES DE LA REGIÓN PROMOTORA DEL GEN BNLF1 QUE CODIFICA LA PROTEÍNA LATENTE DE MEMBRANA 1 (LMP1) DEL VIRUS DE EPSTEIN BARR

GANTÚZ M; LORENZETTI M; ALTCHEH, J.; DE MATTEO E; MORONI S; MOSCATELLI, G.; CHABAY P; PRECIADO MV

CABA

Congreso; X Congreso Argentino de Virología; 2011

Introducción: El Virus de Epstein Barr (EBV) es uno de los agentes causales de la Mononucleosis Infecciosa (MNI) y ha sido relacionado con varias neoplasias. LMP1 es considerada la oncoproteína del EBV por su capacidad de activar proteínas antiapoptóticas y de vías de señalización de proliferación y diferenciación celular. Además, esta críticamente involucrada en la inmortalización y proliferación de los linfocitos B infectadas por el EBV. La transcripción de LMP1 puede ser iniciada por dos promotores, proximal (EDL1) y distal (LTR1). EBNA2 es uno de los transactivadores más potentes de EDL1. Se han descripto mutaciones en distintas secuencias regulatorias dependientes (AP2, PU-box) e independientes (CRE, NF-kBA) de EBNA2. Se ha postulado que la variabilidad de esta región incidiría sobre los niveles de expresión de LMP1, y por ende en la supervivencia de los linfocitos B y el desarrollo de tumores. Objetivo: Estudiar las variantes del promotor del gen BNLF1, en pacientes pediátricos con MNI (infección lítica) y linfomas (infección latente). Métodos: Se analizaron muestras pareadas de secreciones faríngeas (SF) y de células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de 10 pacientes pediátricos diagnosticados con MNI (detección por IFI de anticuerpos anti cápside viral IgM+) y 17 biopsias ganglionares de linfoma de Hodgkin y No Hodgkin, EBV+ por hibridación in situ para EBERs. Se amplificó por PCR anidada la región promotora proximal (-1 a -340) y luego se secuenció. Los resultados se analizaron con el programa Bioedit (versión 7.0).Resultados: Se amplificó la región promotora de BNLF1 en el total de las muestras analizadas. Las muestras pareadas de SF y CMSP no mostraron diferencias en la secuencia. Nueve de 17 linfomas y 5/10 MNI presentaron la misma secuencia que la correspondiente a la cepa de referencia B95.8. Todos los casos que presentaron variantes de la cepa de referencia poseen una mutación común, G→A en la posición -158. En 5 casos (3 linfomas y 2 MNI), se encontraron cambios en sitios de unión de factores de transcripción. En particular las 2 muestras de MNI y 1 de las de linfomas presentan variación en uno de los dos sitios AP2 (diferentes a lo descripto previamente). En los 3 linfomas se hallaron cambios en la secuencia CRE, ya descriptos en la literatura. El resto de las modificaciones encontradas están por fuera de los sitios de interés. Conclusión: Se encontraron mutaciones de promotor diferentes a las descriptas previamente, por lo que podría tratarse de variantes de circulación específicas de nuestra región geográfica, no asociadas a una patología particular. La mayor cantidad de mutaciones en el sitio CRE en pacientes con linfoma confirman observaciones previas que relacionan mutaciones en CRE con el proceso de linfomagénesis. Si bien aún no está totalmente esclarecida la importancia del sitio AP2 en la regulación del promotor, el hallazgo de mutaciones no descriptas previamente indica la necesidad de nuevos estudios funcionales en este sitio.