Estudio de transportadores de Trypanosoma cruzi como blancos terapéuticos contra el Mal de Chagas: caracterización de la permeasa de arginina

SAYE, MELISA; MIRANDA, MARIANA; CAMARA, MARIA DE LOS MILAGROS; BOUVIER, LEON; PEREIRA, CA

CABA

Jornada; X Jornadas científicas del instituto de investigaciones médicas Alfredo Lanari; 2011

IDIM

Introducción: Los organismos protozoarios adaptados alparasitismo fueron reemplazando a largo de su evoluciónrutas metabólicas de biosíntesis por sistemas de transportede metabolitos esenciales. Como consecuencia, muchas víasmetabólicas dependen únicamente de procesos de transporte,haciendo del transporte un mecanismo fundamental para lasupervivencia del parásito. Trypanosoma cruzi cuenta conuna familia numerosa de permeasas de aminoácidosdenominada TcAAAP, muchos de cuyos miembros han sidopreviamente caracterizados. Un aspecto interesante de estafamilia es que no se han encontrado miembros en mamíferosy a diferencia de lo que ocurre en la mayoría de losorganismos, existen evidencias de que estos transportadoresson mono-específicos.Objetivos: En este trabajo se propone validar altransportador de arginina TcAAP3 y confirmar laespecificidad por este sustrato. A su vez se pretende estudiarla localización subcelular poniendo a prueba la hipótesis deque los miembros de la familia TcAAAP se encuentranubicados en la misma región de la superficie celular, elbolsillo flagelar. Por último, se analizará la participación deeste transportador en el metabolismo de arginina de esteparásito.Resultados: Mediante la generación de parásitostransgénicos que sobre-expresan al transportador logramos validar al TcAAP3 como una verdadera permeasa dearginina que transporta específicamente arginina y no otroaminoácido básico como lisina. Por otro lado, mediante lafusión a proteínas fluorescentes pudimos establecer sulocalización en el bolsillo flagelar cerca del collar delbolsillo y más aún, determinamos su co-localización con eltransportador de lisina TcAAP7 previamente caracterizado.Finalmente, observamos que el TcAAP3 actúa como unregulador del metabolismo de arginina ya que parásitos conun aumento significativo en el transporte de este aminoácidopresentaron niveles disminuidos de la enzima argininaquinasa en la fase estacionaria de cultivo.Conclusión: El Mal de Chagas es una enfermedad queafecta millones de personas; la situación actual esespecialmente crítica puesto que las terapias disponibles sonescasas e ineficientes, por lo tanto la búsqueda de nuevostratamientos es prioritaria en nuestro país. La importancia delos resultados obtenidos en el presente trabajo consiste enque estos transportadores podrían ser posibles blancosterapéuticos contra la enfermedad de Chagas puesto quetoda esta familia se encuentra ausente en los hospedadoresmamíferos. A su vez, la mono-especificidad para argininaencontrada para el TcAAP3 indica que el mismo podría serutilizado como puerta de entrada selectiva para nuevasdrogas tripanocidas.