IDIM   12530
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES MEDICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudios de la interacción de la ciclofilina TcCyp19 del Trypanosoma cruzi, con células de mamífero
Autor/es:
ALINA E PERRONE, CÁMARA MARÍA DE LOS MILAGROS , MARIELA N GONZÁLEZ, PATRICIA L BUSTOS, GABRIELA A GARCÍA, ALICIA G FUCHS Y JACQUELINE BUA
Lugar:
buenos aires
Reunión:
Jornada; XXV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias,; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Protozologia
Resumen:
Las ciclofilinas son proteínas chaperonas que intervienen en
el plegado de péptidos que poseen prolina. En el T. cruzi
hemos descripto la familia de ciclofilinas, y entre ellas, una
isoforma citosólica de 19 kDa, la TcCyP19, homóloga a la
CyPA de mamíferos. En estudios previos probamos que esa
ciclofilina posee actividad enzimática y puede secretarse al
medio de cultivo. Con el objetivo de conocer su función
en relación a su interacción con la células de mamífero se
transfectaron epimastigotes de la cepa Y con la construcción
pTEX - TcCyP19 - eGFP. Los parásitos transfectantes, quesobre-expresan la proteína TcCyP19 no mostraron diferencias
en la morfología ni en su tiempo de duplicación, respecto de
los parásitos de tipo salvaje. Se observó que los parásitos
transfectantes son fluorescentes en todo su citoplasma,
confirmando su localización citosólica intracelular. Los sobrenadantes
de epimastigotes transfectantes revelan por
espectrofluorometría la secreción de la proteína TcCyP19
fluorescente. Se obtuvieron tripomastigotes transfectantes
que sobre-expresan TcCyP19. Los sobrenadantes de estos
parásitos, con la TcCyP19-GFP secretada, así como la TcCyP19
recombinante marcada con fluoresceína se adhieren a las
monocapas de células VERO. Por otra parte, los experimentos
de infección de células, comparando los tripomastigotes
transfectantes respecto de los tripomastigotes de tipo salvaje,
no mostraron diferencias significativas en la infectividad en
células de mamíferos. Nuestros resultados indican que la
TcCyP19 del T. cruzi se secreta e interactúa con la célula
del mamífero y los tripomastigotes que sobre-expresan esta
proteína serán una herramienta fundamental para dilucidar el
rol que cumple esta proteína en el huésped mamífero. Este
trabajo contó con la financiación del ANLIS Malbrán, Fogarty
D43TW007888, Focanlis 2010 y CAECIHS, UAI.