Efecto de la gliadina sobre la maduración de células dendríticas humanas?

L GUILLÉN; N PERIOLO; M BARBOZA; A CHERÑAVSKY

Buenos Aires, Argentina

Congreso; LII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica LV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y Sociedad Argentina de Fisiología; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Sociedad Argentina de Inmunología y Sociedad Argentina de Fisiología

Introducción:La gliadina, disparadora de daño tisular en la enfermedad celíaca (EC), posee efectos directos sobre células de respuesta innata (macrófagos, monocitos: Mo, células dendríticas: CDs) cuyos perfiles de expresión de moléculas coestimulatorias determinan su potencial interacción con LT, LB, células NK, etc. La funcionalidad de SLAM (Molécula de Señalización y Activación Linfocitaria) en las CDs es dependiente del tipo de estímulo de maduración y condiciona la respuesta inmune.Objetivos:1-Inducir la diferenciación/activación in vitro de CDs en presencia de gliadina (gTG) y 2-Evaluar el efecto de gTG sobre la expresión de SLAM en CDsMaterial/Métodos: Obtuvimos Mo (n=6 individuos sanos) por purificación secuencial en gradientes de Ficoll-Hypaque y Percoll a partir de células mononucleares de sangre periférica (CMSP) provenientes de ?buffy coats? y los incubamos por 5 días en presencia de GM-CFS(800U/ml) e IL-4(2ng/ml) como inductores de diferenciación a CDs inmaduras (CdIs). El antígeno específico gTG fue preparado por digestión de gliadina cruda (Sigma) con ??-chemotripsina en urea 2M, tratado con transglutaminasa tisular (tTG) y controlada su contaminación por LPS. Las CDs se activaron en presencia de gTG (100 y 250 ug/ml), LPS (1ug/ml), urea 2M, zeína (100 ug/ml) y RPMI. Se realizó marcación triple de las CDs con monoclonales anti-SLAM FITC, -CD11c PerCP y -CD83 PE. Se utilizó el test de Mann-Whitney (dos colas) para los análisis estadísticos.Resultados: La intensidad de fluorescencia media (IFM) en CDs para SLAM disminuyó en presencia de gTG (p=0.004 vs. cultivo con urea; p=0.036 vs. RPMI y p= 0.03 vs. cultivo con zeína) mientras que la IFM para CD83 fue mayor con gTG (p= 0.040 vs. urea, p= 0.043 vs. RPMI y p= 0.030 vs zeína.Conclusiones:Demostramos modulación negativa de SLAM por gliadina en CDs, la cual potencialmente interferiría durante la interacción de las CDs con diferentes células del sistema inmune, particularmente en el contexto de la EC.