Expresión diferencial de las moléculas coestimulatorias CD30, OX40 y SLAM en la mucosa intestinal de celíacos activos

L C GUILLEN; N PERIOLO ; V ALIBONI ; E DE MATEO; L GONZALEZ ; S NIVELONI; HWANG; J BAI; A CHERÑAVSKY

Capital Federal, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Congreso Argentino de Gastroenterología y Endoscopía Digestiva 2010; 2010

&amp;amp;amp;lt;!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Calibri; mso-font-alt:"Century Gothic"; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-1610611985 1073750139 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin-top:0pt; margin-right:0pt; margin-bottom:10.0pt; margin-left:0pt; line-height:115%; mso-pagination:widow-orphan; font-size:11.0pt; font-family:Calibri; mso-fareast-font-family:Calibri; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-language:EN-US;} p.MsoHeader, li.MsoHeader, div.MsoHeader {mso-style-name:"Encabezado, Car"; mso-style-link:" Car Car Car"; margin:0pt; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; tab-stops:center 220.95pt right 441.9pt; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p.MsoBodyTextIndent, li.MsoBodyTextIndent, div.MsoBodyTextIndent {mso-style-link:" Car Car1"; margin-top:0pt; margin-right:25.25pt; margin-bottom:6.0pt; margin-left:14.15pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES-AR; mso-fareast-language:ES-AR;} span.CarCarCar {mso-style-name:" Car Car Car"; mso-style-locked:yes; mso-style-link:"Encabezado, Car"; mso-ansi-font-size:12.0pt; mso-bidi-font-size:12.0pt; mso-ansi-language:ES; mso-fareast-language:ES; mso-bidi-language:AR-SA;} span.CarCar1 {mso-style-name:" Car Car1"; mso-style-locked:yes; mso-style-link:"Sangría de texto normal"; mso-ansi-font-size:12.0pt; mso-bidi-font-size:12.0pt; mso-ansi-language:ES-AR; mso-fareast-language:ES-AR; mso-bidi-language:AR-SA;} @page Section1 {size:595.3pt 841.9pt; margin:70.85pt 85.05pt 70.85pt 85.05pt; mso-header-margin:35.4pt; mso-footer-margin:35.4pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --&amp;amp;amp;gt; Introduccion En condiciones no patológicas, la integridad y homeostasis de la mucosa duodenal  está sometida a una fina y compleja regulación dada en parte por la expresión de moléculas coestimulatorias (MC) de la súperfamilia del factor de necrosis tumoral y su receptor (TNF/TNF-R) tales como CD30/ OX40 / OX40L, y de las inmunoglobulinas (CD150) como SLAM (Molécula de Activación y Señalización Linfocitaria). La gliadina, como agente disparador de la  enfermedad celíaca (EC), es responsable de la pérdida de la homeostasis intestinal y de  la consecuente respuesta inmunopatogénica. La expresión de MC, fuertemente influenciada por el microambiente local, regula el tipo de interacciones posibles entre células del sistema inmune y procesos de diferenciación / activación y proliferación de linfocitos de lámina propia  (LPLs) e intraepiteliales (LIEs).  La perturbación homeostática en la mucosa intestinal de un celíaco se manifestaría a través de una alterada expresión de MC en LPLs y/o LIEs. Objetivo: Caracterizar el perfil de moléculas de activación temprana y tardía así como de MC en subpoblaciones de LPLs y LIEs en pacientes celíacos (Ce) e individuos control (Co) Materiales y Métodos: Los pacientes Ce fueron seleccionados en base a parámetros bioquímicos, histológicos y serológicos. La población Co se conformó por individuos no  celíacos. Se aislaron LPLs y LIEs de piezas de biopsia intestinal  provenientes de 5Ce y 11Co pediátricos, y de 12Ce  y 7Co adultos. La fracción de LIEs se obtuvo luego de  incubar las biopsias en buffer HBSS (1X) (libre de Ca2+y Mg2+) EDTA (1mM)  DTT (1mM), 1h a 370C con agitación (200 rpm). La fracción de LPLs se obtuvo luego de incubar el tejido remanente en 25ml de RPMI-1640 completo con colagenasa A (10mg/ml), 1 h 30´ a 37 0C con agitación. Ambas suspensiones celulares fueron independientemente sometidas a inmunomarcación con diferentes combinaciones triples utilizando  anticuerpos (anti-CD3Per CP, -CD45RO PE/FITC o -CD25 PE/FITC o -CD69 PE,  -CD30FITC  o -OX40FITC, o -OX40L PE o -SLAMFITC) y posterior análisis por citometría de flujo (BD FACSAria II). Los resultados se compararon mediante test t de  Student´s. Resultados: Los Ce pediátricos presentan menor expresión basal de CD30 en LPLs,  y de OX40 en LIEs con respecto a los Co (2,3 ± 0.4 (n=11) vs. 8,2 ± 2.2 (n=5), p=0.016 y 5,3 ± 1,3  (n=6) vs. 12,2 ± 3,2 (n=4), p=0.0221) respectivamente)  Los  Ce adultos, por otra parte,  presentan menor expresión basal de SLAM en LPLs respecto de los Co (25,7 ± 5,1 (n=7) vs. 47,1 ± 3,7 (n=6), p<0.05). Todas las moléculas coestimulatorias se expresan exclusivamente en células CD45R0+ y CD25+. Conclusiones: Una alterada expresión de moléculas coestimulatorias en células del sistema inmune podría perpetuar la respuesta patológica. Esto refleja notables diferencias entre pacientes pediátricos y adultos cuyas implicancias biológicas quedan aún por definir.