INVESTIGADORES
BISBAL Mariano
congresos y reuniones científicas
Título:
ROL DE CDK5 EN LA ARQUITECTURA DEL APARATO DE GOLGI
Autor/es:
QUASSOLLO G, BISBAL M , PAGLINI G, CACERES A.
Lugar:
Los Cocos
Reunión:
Congreso; XXII Reunión anual Sociedad Argentina de Neurociencias; 2007
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION EN NEUROCIENCIAS
Resumen:
Las neuronas son
células altamente polarizadas que presentan asimetrías estructurales y
funcionales; generadas y mantenidas por el citoesqueleto y por su transporte
selectivo, activo y continuo de materiales desde el aparato de golgi, a sus
destinos finales, los cuales son fundamentales para el mantenimiento de la
morfología celular y su correcto funcionamiento. Recientes evidencias obtenidas
por nuestro laboratorio muestran que en neuronas en desarrollo, la
serina-treonina kinasa LIMKI regula la dinámica del aparato de golgi y promueve
la axogenesis atraves del transporte selectivo de proteínas al cono de
crecimiento a partir de esta novedosa localización subcelar.
LIMKI regula el
citoesqueleto de actina en el aparato de golgi fosforilando el sitio único,
serina 3, del efector ADF-cofilina, inhibiendo su capacidad de unión a
monómeros de actina y por ende su capacidad depolimerizante. LIMKI es un
efector de PAKI (p21 acivated GTPase Kinase I), que se activa cuando esta
asociado a pequeñas GTPasas como Rac y cdc42 activas.
CDK5 (kinasa 5
dependiente de ciclinas) es una serina treonina kinasa con una importante
funcion reguladora en la migración neuronal durante el desarrollo, y participa
en la sinaptogenesis y neurotransmisión. Novedosas evidencias muestran que
CDK5/P35 de manera RAC dependiente, tiene la capacidad de modular a PAKI.
A partir de este
creciente cuerpo de datos, decidimos estudiar si CDK5/P35 regula la dinamica de
actina en el aparato de golgi y en consecuencia la citoarquitectura de esta
organela. Para ello utilizamos Roscovitina, un inhibidor farmacologico específico
para CDK5 que actua por competencia. En neuronas piramidales de hipocampo (7
DIV) tranfectadas con GALT2, un marcador de la porción cis y medial del aparato
de golgi, y tratadas con Roscovitine, observamos una disminucion del área de
esta organela respecto al grupo control. Células transfectadas con LIMKI KD
(mutante deficiente en su actividad kinasa) y tratadas con roscovitina muestran
un area de golgi incluso mayor que en los controles (indicando
que esta kinasa se encuentra regulado agas debajo de CDK5). Efectos
similares se observaron cuando se sobreexpreso un activador específico de CDK5
como P35. Observamos que células tratadas con el inhibidor de CDK5 presentaban
un aumento en los niveles de cofilina fosforilada y una disminución en los
niveles de PAKI fosforilada.
Apartir de estos
resultados podemos decir que CDK5/P35 tiene un rol fundamental en la regulación
de la arquitectura del aparato de golgi regulando la dinamica de actina atraves
de la actividad de cofilina-LIMK1 modulando su efector aguas abajo PAK1