INVESTIGADORES
MARTINEZ SAYE Melisa Soledad
congresos y reuniones científicas
Título:
En busca de nuevas funciones de la nDPK1 de Trypanosoma cruzi
Autor/es:
PEREIRA CA; DI GIROLAMO F; SAYE M; CAMARA MM; MIRANDA MR
Reunión:
Congreso; XXV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2012
Resumen:
Las nucleósido difosfato quinasas (NDPK) son enzimas
que cumplen un importante rol en el balance intracelular
de nucleótidos mediante la transferencia de fosfatos de alta
energía entre nucleósidos trifosfato y difosfato. Además,
están asociadas a numerosos procesos biológicos, razón por
la cual son consideradas enzimas multifuncionales. Algunas
NDPKs de organismos patógenos son secretadas y actúan
como factor de virulencia. La TcNDPK1 es una NDPK del
parásito Trypanosoma cruzi atractiva para su estudio puesto
que resultados previos indican que se une a secuencias de
ADN, tiene actividad nucleasa y participa en mecanismos
de resistencia a drogas tripanocidas que generan daño al
material genético. A su vez, si bien presenta una localización
principalmente perinuclear cuando es fusionada a la proteína
GFP y expresada en parásitos produce gránulos que podrían
estar vinculados con la naturaleza hexamérica de la NDPK
y la dimerización de la proteína reportera. En el presente
trabajo profundizamos el estudio de la formación de dichos
gránulos mediante la generación de mutantes y encontramos
que mutaciones que afectan la actividad de la enzima (T93A
y H117N) no alteran la formación de los gránulos mientras
que una mutación que impide dimerizar a la GFP (A206K)
si lo hace. Actualmente, estamos construyendo una mutante que desestabiliza la estructura cuaternaria de la NDPK y que
nos permitirá comprender más sobre este fenómeno. Es
probable que estos gránulos ocurran dentro de las células
como parte del funcionamiento normal de la NDPK y que se
magnifiquen debido a la fusión. Por otro lado, exploramos la
posible secreción de la enzima y su posible rol como factor
de virulencia. Encontramos que TcNDPK1 es secretada
por epimastigotes de T. cruzi en condiciones normales de
cultivo. Todos estos resultados sugieren que la TcNDPK1 es
una enzima multifuncional que podría actuar a nivel nuclear,
intervenir en la enfermedad de Chagas y en muchos otros
procesos aún por investigar.