: “Identificación por phage display del epitope conformacional LHKTSXS del hexón de adenovirus tipo 3”

CASABONA J.C; BARRERO, P; MISTCHENKO AS

Congreso; XLVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2002

Sociedad Argentina de Investigación Clínica.

Los adenovirus humanos (Ads) comprenden 51 serotipos, divididosen 6 subgéneros (A-F). La cápside posee 3 proteínas: pentón,base del pentón y hexón. Los epitopes tipo específicos se encuentrandistribuidos en 7 regiones hipervariables (HVRs), contenidasen 2 loops del hexón. En el presente estudio, se utiliza una bibliotecade fagos que expresan hexámeros al azar (RPL), para descubrirepitopes mediante un anticuerpo monoclonal (Mab 8048) producidocontra el hexón de Ad 3 (subgénero B). La técnica, denominada“paneo”, consistió en incubar la RPL con bolillasparamagnéticas cubiertas con proteína G, unidas al Mab 8048. Elfago no unido, se retiró, y el fago unido en forma específica se eluyópara su amplificación y posterior paneo sucesivo. Luego de tresrondas, se secuenciaron 9 clones, que mostraron la secuencia consensoLHKTsXs. La comparación del epitope LHKTsXs con lassecuencias correspondientes al hexón de diferentes serotipos deAds, no pudo alinearse linealmente con el epitope encontrado.Debido a que los epitopes serotipo específicos se encuentran enlas HVRs de los loops (L1, 182 residuos, y L2, 47 residuos), seanalizó la relación entre los mismos, inter subgénero (A-F) e intrasubgénero B (serotipos: 35, 34, 21, 7, 3 y 16) encontrando que elepitope no es discontinuo, y por lo tanto, sería conformacional. Asimismo,se confirmo mediante gráficos de similitud que la variabilidaddel hexón en su totalidad es inferior a la de los loops.