Actividad catalítica, función y expresión diferencial de isoformas de CD45 en células Natural Killer en reposo y endógenamente activadas en el sitio de infección tuberculoso

SCHIERLOH P; LANDONI V; LABORDE E; BALBOA L; MUSELLA RM; CASTAGNINO J; PALMERO D; DE CASADO G; SASIAIN MC

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Sociedad Argentina de Inmunología

La fosfatasa de membrana CD45, una de las glicoproteínas más abundantes en leucocitos, es crucial en la señalización vía BCR y TCR. El splicing alternativo de los exones 4,5 y 6, da lugar a isoformas cuya expresión diferencial en linfocitos T depende del estadío madurativo y diferenciación celular. Ratones KO muestran que CD45 no es esencial para el desarrollo de células NK funcionales aunque su respuesta a ligandos naturales se encuentra severamente afectada. Aquí, analizamos la expresión de diferentes isoformas de CD45, su actividad enzimática y su rol en la producción de TNF-alfa, IFN-γ y la degranulación en células NK humanas en reposo y NK endógenamente activadas obtenidas del líquido pleural (LP) de pacientes con tuberculosis (LP-NK). En reposo, el subset NK CD56bright expresa menos CD45 total que el subset CD56dim, y estos últimos menos que los linfocitos T, lo cual esta correlacionado con una menor actividad enzimática basal. Por el contrario, la densidad CD45RA es mayor en NK en reposo que en células T naive o LP-NK. La isoforma CD45R0, virtualmente ausente en NK en reposo, se expresa en una subpoblación de LP-NK. Dicha población está enriquecida dentro de las células que responden in vitro a Mycobacterium tuberculosis. En células NK estimuladas con IL12+IL18+IL15, la producción de IFN-γ y TNF-alfa se bloquea parcialmente en presencia del inhibidor farmacológico de CD45. Asimismo, en células activadas por entrecruzamiento de receptores asociados a proteínas adaptadoras CD3z/FcRγ (CD16, NKp30 y NKp46) tanto la degranulación como la producción de citoquinas son dependientes de CD45. Juntos, estos resultados indican que, en células NK humanas la actividad catalítica de CD45 tiene un rol importante sobre vías de señalización independientes, lo cual se correlaciona con la regulación diferencial de la expresión de sus isoformas en función de la maduración y diferenciación NK.