INVESTIGADORES
MICHAUT Marcela Alejandra
congresos y reuniones científicas
Título:
Identificación de la proteína VAMP2 en ovocitos maduros de ratón
Autor/es:
GAUNA, GISELA V.; BELLO, OSCAR D.; ZANETTI, MARIA N.; MICHAUT, MARCELA A.
Lugar:
Mendoza
Reunión:
Jornada; XI Jornadas de Investigación de la Facultad de Ciencias Médicas Universidad Nacional de Cuyo 2010; 2010
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Cuyo
Resumen:
PROYECTO: IDENTIFICACIÓN DE LA PROTEÍNA VAMP2 EN OVOCITOS
DE RATÓN
Alumna: Gisel Valeria Gauna
Directora: Dra. Marcela Alejandra Michaut
Colaboradores: Lic. Oscar Daniel Bello, Lic. María Natalia Zanetti
Lugar:
Instituto de Histología y Embriología CONICET, Facultad de Ciencias Médicas.
Introducción
La exocitosis regulada es un complejo proceso que implica la fusión del gránulo
secretorio con la membrana plasmática.
Este proceso requiere un conjunto de proteínas
que median o regulan la fusión
de membranas (1), entre las que se encuentran las proteínas SNARE (2) y Rab (3) quienes, en asociación con los numerosos factores que
interaccionan con ellas, constituyen la base del mecanismo de reconocimiento y fusión de membranas
Los SNAREs son un grupo de proteínas asociadas a membranas capaces de formar complejos de
extraordinaria estabilidad. Dentro de estas proteínas encontramos las familias de las sintaxinas, VAMPs y SNAP-25 que
forman complejos heterotriméricos
durante el proceso de fusión
de membranas.
Estos complejos ternarios son muy estables, pero experimentan un
ciclo de ensamble-desensamble mediante la interacción con NSF, una ATPasa con características de chaperona, y α-SNAP,
una proteína que regula la actividad ATPasa de NSF. Se
piensa que la energía
liberada durante la formación
del
complejo SNARE es utilizada para iniciar el proceso de fusión de membranas. La noción de que las SNAREs participan en la
exocitosis regulada de las vesículas
sinápticas ha tenido un enorme apoyo a partir de
que fueron identificadas como las proteínas
blanco de varias neurotoxinas. La toxina tetánica y las botulínicas
son proteasas que cortan específicamente
a varias SNAREs y de este modo bloquean la liberación de neurotransmisores (4). Un incremento de
calcio libre en el citoplasma es generalmente la señal que dispara la exocitosis regulada (5). Es
interesante observar que varias de las proteínas que participan en el transporte intracelular tienen dominios
que unen calcio. En particular se ha postulado que sinaptotagmina y calmodulina
son sensores de calcio libre en el citoplasma y regulan la fusión de membranas durante la exocitosis en
diversos modelos.
Cuando el espermatozoide fecunda el ovocito maduro, se desencadena
una cascada de señalización intracelular que culmina con la fusión de los gránulos corticales con la membrana plasmática del huevo maduro, liberando su contenido
enzimático al espacio perivitelino y modificando la
zona pelúcida (6). Este proceso secretorio se halla
altamente regulado y es de fundamental importancia ya que constituye el bloqueo
primario de la polispermia garantizando el normal desarrollo de un organismo diploide
(7). Al igual que en otros procesos exocíticos
regulados, la fusión
de los gránulos corticales con
la membrana plasmática
es regulada por Ca2+, e involucra una compleja cascada de señalización
en la que interviene inositol trifosfato (IP3), proteína quinasa dependiente de calcio y
calmodulina (CaMKII) y proteina quinasa C (PKC) (7). En ovocito de ratón solo cuatro proteínas han sido identificadas en la fusión de los gránulos corticales con la membrana plasmática: Rab3A (8), Rabfilina 3A (9), SNAP-25
(10), y Sintaxina 4 (11) y hasta el momento el mecanismo molecular de esta
exocitosis no ha sido caracterizado (12).
Hipótesis
Nuestra hipótesis
de trabajo es que el mecanismo molecular de la fusión de membranas durante la exocitosis es un
mecanismo universal que comparte la maquinaria proteica básica con otras exocitosis conocidas tales
como la exocitosis neuronal y acrosomal. En particular, la hipótesis de este proyecto es que la proteína VAMP2, está presente en
ovocitos de ratón y participa
en la exocitosis de gránulos corticales.
Por lo tanto, este proyecto
propone determinar la presencia y la localización de VAMP2 en ovocitos
de ratón.