Estudio de trombopoyesis en trombocitopenias inmunes.

LEV PAOLA R; GRODZIELSKI MATÍAS; GOETTE NORA P; ESPASANDIN YESICA R; GLEMBOTSKY ANA C; FERRARI LUCIANA; HELLER PAULA G; MOLINAS FELISA C; MARTA ROSANA F

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2011

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).

Durante la trombopoyesis el megacariocito maduro (MK) emite prolongaciones citoplasmáticas llamadas proplaquetas (PP) desprendiéndose de sus extremos (tips) las preplaquetas y plaquetas. La apoptosis citoplasmática localizada parece tener un rol en este proceso. La etiología de la trombocitopenia inmune (TI) es principalmente la destrucción periférica de plaquetas y la inhibición de la megacariopoyesis debidas a autoanticuerpos (autoAc) y a disfunción de la inmunidad celular. En este trabajo se evaluó la formación de PP y la apoptosis de MK ya que son aspectos no esclarecidos en esta patología. Progenitores CD34+ obtenidos de sangre periférica de 9 pacientes (P) y 5 normales (N) se cultivaron entre 14 a 16 días para obtener MK. En estas muestras se realizó inmunofluorescencia para detectar GPalfa2bbeta3 (BD) y caspasa 3 activa (CST) y citometría de flujo para evaluar pureza (CD61) y madurez (CD42b) de MK. Se midió el diámetro plaquetario máximo (DPM) (software de análisis celular) en frotis de sangre periférica teñidos con May Grumwald Giemsa. La especificidad de los autoAc se determinó por ELISA en el plasma. La pureza de Mk obtenidos el día 13 de cultivo P 60,9%, N 65,4%; la madurez P 35,4%, N 40,3%, el porcentaje de núcleos picnóticos P 25,6%, N 30,2% (Hoesch), de MK positivos para caspasa 3 activa P 19,6%, N 7,5%; y de PP producidas P 1,16% y N 1,39%, fue semejante en P y N. En 4/6 pacientes se observó mayor frecuencia de engrosamiento de PP: P rango 5,9-56,5% (VN 0-23) (p=0.066 Test de Wilcoxon). El área de los tips fue semejante en P 18,7m2 y N 18,3m2, mientras que el DPM estuvo aumentado en 3/6 P: rango 2,4-4,1m (VN=2,03-2,77). No se halló relación entre el área de los tips y el DPM plaquetario. Uno de 6 pacientes tuvo autoAc contra la GPalfa2bbeta3 en plasma y eluído plaquetario y otro contra la GPIaIIa en plasma. En conclusión, se constataron anormalidades en la trombopoyesis en TI, mientras que la activación de caspasa 3 en MK de TI fue similar a los normales.