Flujo de agua a través de la aquaporina-1 humana: inhibición por furosemida, y flujo máximo con gradientes osmóticos altos

M. TERESA POLITI; MARCELO OZU; LUCIANO GALIZIA; HORACIO CORTI; BASILIO A. KOTSIAS; RICARDO A. DORR; ROXANA TORIANO

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Anual 2010 de la Sociedad Argentina de Fisiología, XLII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2010

SAIC - SAFIS - SAFE

La acuaporina 1 (AQP1) es el canal para agua mejor estudiadodesde el punto de vista estructural. Sin embargo aún es poca lainformación que existe en cuanto a la interacción de Aepl conotras proteínas transmembrana, en relación a la homeostasiscelular de agua y solutos. su expresión en endotelio y en célulasdel músculo liso, tejidos que no manejan grandes volúmenes acuosos,abre el interrogante del rol fisiológico de la misma en estascélulas. Ha sido reportado recientemente que Aepl sería capazde transportar No. A su vez y en las mismas células endotelialesel canal de sodio ENac parece estar relacionado con la liberacióndel No. Para abordar estos interrogantes utilizamos un modelo conambas proteínas co-inyectadas en el ovocito de Xenopus taevis.Por otra parte y en el marco del mismo interrogante, estudiamosla AQPl co-inyectada con TRET1, una proteína transportadora detrehalosa, un disacárido potencialmente útil como crio-protectorcelular, que previene la agregación proteica en enfermedadescomo la de Huntington. En la naturaleza, el TRETl co_expresacon un análogo de AQPl en un insecto anhidrobiótico. El ARNcse obtuvo a partir de plásmidos construidos con el inserto codificantepara la proteína de interés: TRET1, la proteína de fusiónTRET-GFP y ENaC (rendimientos: 1,86 trglpt; 0,8 pg/pt; 1,5 pg/pt,respectivamente), que luego inyectamos en los ovocitos en estadioVl (H´ 1,3 mm de diámetro). Nuestros resultados de microscopíade fluorescencia muestran la expresión de TRET_GFp en lamembrana del ovocito. por otra parte, experimentos funcionalesmostrarían la influencia de TRET1 en el comportamiento osmGtico del sistema a tiempos largos (t < 500 s, con un aumento devolumen cercano ar s%). En el caso del ENac observamos que,si bien la expresión de esta proteína altera las propiedades eiéctricasdel ovocito, no parece modificar sus propiedades osmóticas,permitiendo entonces elucidar la influencia de Aepl en el modelode ovocitos co-inyectados.