INVESTIGADORES
MESSINA German Alejandro
congresos y reuniones científicas
Título:
Fluorescencia inducida por laser aplicado en un sensor bioanalítico para la cuantificación de anticuerpos IgG anti-Helicobacter pylori en muestras de suero humano
Autor/es:
SEIA, MARCO A.; FONTAN, CARLOS M; DE VITO, IRMA E.; MESSINA, GERMÁN A; RABA, JULIO
Reunión:
Congreso; 6to Congreso Argentino de Química Analítica; 2011
Resumen:
Helicobacter pylori es un microorganismo que afecta al 50% de la población
mundial. Su patogenia le permite causar desde los Reflujos Gastroesofágicos
hasta el Cáncer Gástrico y el Linfoma de MALT (Linfoma de la Mucosa Asociado al
Tejido Linfoide) [1], por ello ha sido clasificado por la Agencia Internacional
de Investigación del Cáncer dentro del grupo I de carcinógenos.
En este trabajo se describe el desarrollo de un inmunosensor microfluídico
acoplado a fibras ópticas con detección LIF (Fluorescencias Inducida por Láser)
para la cuantificación de anticuerpos IgG anti-helicobacter pylori en muestras de suero humano.
El sensor es un dispositivo
microfluídico construido de plexiglás,
el cual se integró a un sistema FIA (Análisis por Inyección en Flujo), para
llevar a cabo la detección del analito empleando un inmunoensayo no
competitivo [2]. Antígenos purificados de H. pylori fueron inmovilizados sobre
partículas de vidrio de porosidad controlado, modificado con grupos
3-aminopropilo. Dichas partículas fueron empaquetadas en el microcanal central
del dispositivo. Posteriormente, los anticuerpos presentes en las muestras, reaccionaron
inmunológicamente con los antígenos inmovilizados. A continuación, los anticuerpos
que reaccionaron fueron cuantificados utilizando un segundo anticuerpo anti-cadenas
γ humanos, marcado con isotiocianato de fluoresceína.
La fluorescencia relativa obtenida del inmunocomplejo generado fue
directamente proporcional a la concentración de anticuerpos de tipo IgG en las muestras
de suero. El tiempo total del ensayo fue de 25 minutos, habiendo realizado la
detección por LIF en menos de 1 minuto. Los límites de detección calculados
para la metodología propuesta y el procedimiento de ELISA fueron de 0,21 y 2,1
UmL-1 respectivamente y los coeficientes de variación intra e inter ensayo
fueron menores al 5%. Los resultados obtenidos muestran la utilidad potencial de
nuestro microbiochip para la determinación rápida de anticuerpos de tipo IgG
anti H. pylori.