Impacto de la infección por Brucella abortus, Brucella suis Y Brucella melitensis en la respuesta inmune innata y la liberación de vesículas extracelulares por la placenta

LUCIA ZAVATTIERI; MARIA NOÉ GARCIA; DANIEL GRASSO; FLORENCIA MUÑOZ GONZALEZ; PABLO C. BALDI; NATALIA SZPILBARG; MARIANA C. FERRERO

Buenos Aires

Workshop; I WORKSHOP ANUAL DEL GRUPO ARGENTINO DE VESÍCULAS EXTRACELULARES; 2023

Grupo Argentino de Vesículas Extracelulares (GAVE)

La inmunidad placentaria resulta crucial para el bienestar fetal en la gestación, ya que los patógenos invasores se transmiten de la sangre materna al feto a través de este órgano. No obstante, respuestas inflamatorias excesivas en la placenta pueden ser perjudiciales tanto para el feto como para la madre gestante. Las vesículas extracelulares (VE), estructuras membranosas vitales en la inmunidad placentaria, son generadas por los trofoblastos placentarios y regulan la tolerancia inmunológica hacia el feto y la propia placenta, pero también pueden desencadenar respuestas inflamatorias. Las infecciones por Brucella están ligadas a complicaciones reproductivas en humanos y animales. Investigamos el impacto de la infección por B. abortus y B. melitensis en la respuesta inmunitaria innata de la placenta y la producción de VE, mediante un modelo de explantos de placenta humana a término infectados ex vivo. A las 18 horas postinfección, recolectamos sobrenadantes de cultivo para determinar citoquinas, quimiocinas y MMP por ELISA comerciales y zimografía, respectivamente. Las "VE pequeñas" se aislaron por ultracentrifugación de sobrenadantes de cultivo de explantos infectados y no infectados.Nuestros hallazgos revelan que la infección con B. abortus, B. melitensis y B. suis inducen la producción de MCP-1, IL-6, IL-10, TNF-α, IL-1β y se observa producción de actividad colagenasa total y actividad MMPEl análisis de microscopía electrónica de transmisión reveló la presencia de VE pequeñas esféricas con doble membrana. Resultados iniciales indican que las VE de explantos infectados con B. melitensis son más pequeñas que las del control no infectado (p < 0.05), según se determinó por DLS. Las VE pequeñas en placentas infectadas con estas especies de Brucella o no infectadas resultaron en poblaciones positivas para CD63, otras positivas para CD81 y otra población positiva para ambos marcadores en microscopía de fluorescencia. A continuación, proponemos evaluar el impacto de las VE pequeñas en placentas infectadas en la diferenciación, migración y modulación de la respuesta inmunitaria de monocitos/macrófagos, además de caracterizar el contenido proteico mediante proteómica.En conjunto, estos resultados preliminares sugieren que la infección de explantos de placenta con B. abortus, B.suis o B. melitensis induce una respuesta inmunitaria innata y afecta el tamaño de las VE pequeñas liberadas.