El an¨¢lisis prote¨®mico por microaarray de anticuerpos define un perfil de prote¨ªnas expresado por c¨¦lulas metast¨¢sicas de c¨¢ncer de mama humano triple negativo

ROBERTI, M PAULA; BIANCHINI, MICHELE; BRAVO, ALICIA IN¨¦S; LEVY, ESTRELLA MARIEL; MORDOH, JOS¨¦; BARRIO MM

Congreso; LVI REUNION CIENTIFICA ANUAL-SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACION CLINICA; 2011

Los tumores de mama humano que no expresan RE, RPg ni HER-2 (triple negativos-TN), son los m¨¢s agresivos y a¨²n no se cuenta con tratamientos efectivos. La l¨ªnea celular IIB-BR-G fue aislada a partir de un tumor primario humano TN y su variante metast¨¢sica MT6, generada luego de transplantes sucesivos en ratones nude, desarrolla met¨¢stasis (mts) en ganglios linf¨¢ticos y es altamente invasiva in vitro. Para identificar un perfil prote¨®mico asociado a la mts utilizamos un microarray de anticuerpos (glass chips) para evaluar simult¨¢neamente la expresi¨®n de 168 prote¨ªnas (principalmente citoquinas, quemoquinas y factores de crecimiento) comparando IIB-BR-G y MT6, extractos celulares (CEL) y medios condicionados libres de suero fetal bovino (MC). Para MT6 la secreci¨®n al MC aument¨® para 37 prote¨ªnas y disminuy¨® para 27, siendo las m¨¢s sobre-expresadas IL1b, CSF3, IGFBP1, CXCL1, CCL20 mientras que VEGFD, CXCL12, ICAM3, AgR e IL12 se encuentran entre las sub-expresadas. Para MT6 CEL se encontraron 24 prote¨ªnas sobre-expresadas (entre ellas CCL3, CSF3, IL2R¦Á, CXCL1, y PGF) y 6 sub-expresadas (TNFRSF21, Siglec5, IL2R¦Â VEGFR2,TIE, PECAM). El an¨¢lisis funcional del perfil prote¨®mico evidencia categor¨ªas significativamente desreguladas en MT6 respecto de la parental IIB-BR-G: 1-factores pro-angiog¨¦nicos y linfangiog¨¦nicos (VEGFA, IL8, PGF, ang, HGF, IL1¦Á, IL1¦Â, LAP, FGF2, VEGFC, MMP9, TEK, PDGFA); 2- prote¨ªnas involucradas en stress oxidativo tumoral-estroma (CCL5, CSF2, ICAM1, IL17, IL1¦Â, IL8, LAP, TNFSF11); 3-factores pro-proliferativos y de supervivencia (IGFBPs, IL4, PDGFA, HGF, FGF2, FGF9, IL1, EGFR); 4- inductores potenciales de transici¨®n epitelio-mesenquimal (LAP, IL6, HGF, FGF9, MMPs); 5- actividad endopeptidasa (MMP1, MMP9, MMP13, HGF),entre otras. Durante la selecci¨®n metast¨¢sica in vivo MT6 modifican la expresi¨®n de m¨²ltiples factores capaces de modular el estroma tumoral, favorecer la angiog¨¦nesis, migraci¨®n e invasi¨®n tumoral y as¨ª contribuir a la mts.