La señalización vía receptores de membrana de la esfingosina-1-fosfato es necesaria para el ensamblado de adhesiones focales en el epitelio pigmentario de retina

TORLASCHI CAMILA; GUTIERREZ JOFRE GABRIELA; ROTSTEIN NORA PATRICIA; SIMON MARIA VICTORIA

Córdoba

Congreso; XIV Reunión Anual de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2023

AIVO

Objetivos: La disrupción de la barrera formada por células del epitelio pigmentario de la retina (EPR) caracteriza a muchas retinopatías proliferativas. Esta barrera requiere del correcto ensamblaje de las adhesiones focales (FA). Demostramos que un esfingolípido bioactivo, la esfingosina-1-fosfato (S1P) promueve la migración y respuesta inflamatoria en estas células. Investigamos ahora si S1P regula la formación de FA. Métodos: tratamos a cultivos de la línea celular de EPR, ARPE-19, con PF543, inhibidor de esfingosina quinasa 1 (SphK1), con S1P o ceramida-1-fosfato (C1P), o con W146 y JTE2, antagonistas para los receptores S1P 1 y 2 (S1P1, S1P2), respectivamente. Analizamos migración por el ensayo de la herida, y la morfología celular y expresión de paxilina, proteína de ensamblado de las FA, por citoquímica.Resultados: el PF543 disminuyó la migración celular en cultivos confluentes. En cultivos 50% confluentes, PF543 indujo la retracción celular, con 34±2% (p>0,01) de células elongadas, ausentes en los controles. La relación largo/ancho celular aumentó de 1,6 en los controles a 5,3 con PF543. El agregado de S1P, y no de C1P, restauró la morfología celular, reduciendo las células elongadas a 8±1.4%. W146 y JTE2 bloquearon parcialmente la recuperación de la morfología inducida por S1P. El PF543 provocó la desaparición de los acúmulos punteados de paxilina presentes en los controles, y el agregado de S1P los restauró.Conclusiones: la señalización de adentro hacia afuera de S1P, a través de S1P1 y S1P2 es esencial para preservar la morfología de las células de EPR y el ensamblaje de las FA.