Desglicosilación de metabolitos de Opuntia robusta y sulphurea con diglicosidasas fúngicas

LUIS LOPEZ; MARIO CAMPO; ALEXANDER FRIES; GRISELDA CORRAL; JAVIER D. BRECCIA; MICAELA BAGLIONI; GISELA WEIZ; ROCIO DE LEON; LAURA S. MAZZAFERRO

Santa Rosa

Jornada; Jornada CyT UNLPam; 2023

UNLPam

La diversidad de especies vegetales constituye una importante fuente de metabolitos secundarios bioactivos. Unos de estos compuestos (isoramnetin 3-O-rutinosil-7-O-ramnósido) es conocido por sus actividades antioxidantes, antiinflamatorias y antitumorales. y fue descripto en especies del género Opuntia. La modulacion de la actividad de este metabolito puede ser modificada mediante la desglicosilacion regioespecifica, para ello nos propusimos utilizar enzimas fúngicas con diversos grados de especificidad de sustrato. Se prepararon extractos vegetales alcohólicos (etanol al 96%) de los tejidos clorenquimatosos de los cladodios de O. robusta y O. sulphurea colectadas en el jardín botánico del Campus-UNLPam. Estos contenían azúcares reductores (2.2 ± 0.8 y 5.2 ± 1.2 mg/g), polifenoles totales (1.4 ± 0.6 y 1.5 ± 0.1 mg GAE/g), flavonoles totales (0.69 ± 0.08 y 0.49 ± 0.02 mg/g) y además poseían actividad antioxidante (66.08 ± 1.9 y 68.25 ± 9.86 acido ascórbico μM/g) de O. robusta y O. sulphurea respectivamente. Los extractos secos se resuspendieron en DMF, para utilizarlos como sustratos de las reacciones enzimáticas con α-Ramnosil-β-Glucosidasa (α-RβG) I y II de Acremonium sp. DSM 24697 y Aromase™ H2 de P. multicolor. Dos de las enzimas (α-RβG I y Aromase™ H2) fueron capaces de desglicosilar metabolitos desde el extracto de O. robusta, mientras que desde el extracto de O. sulphurea sólo se encontró desglicosilación con la enzima comercial Aromase™ H2. Dichos resultados pueden relacionarse con la regiospecificidad de las enzimas utilizadas. Dado que Aromase™ H2 posee una mayor promiscuidad, fue capaz de reconocer e hidrolizar glicoconjugados en ambas especies. Por otro lado, la actividad de α-RβG I se restringió a la especie O. robusta. Dado que rutinosa es el único residuo sacarídico que escinde α-RβG I desde varias agliconas, probablemente este residuo sólo se encuentre presente en el extracto de O. robusta.