Estudio funcional de microRNAs en parásitos cestodos

GRECCO A; MACCHIAROLI N; CUCHER M; ROSENZVIT M

Congreso; XI Congreso de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Mesocestoides vogae es un parásito platelminto validado como modelo de laboratorio de laclase Cestoda. Esta clase incluye especies como Echinococcus granulosus y E. multilocularis quecausan enfermedades desatendidas como equinococosis. Los microRNAs (miRNAs) sonpequeños ARNs no codificantes que regulan la expresión génica a nivel post-transcripcionalreconociendo sitios en el 3’UTR de sus ARNm blanco e inhibiendo su expresión. miR-71 es unmiRNA altamente expresado en parásitos cestodos, ausente en vertebrados y con genes blancoesenciales para la biología parasitaria, por lo que representa un potencial blanco terapéuticoselectivo. Previamente se silenció miR-71 en cultivos celulares primarios de E. multilocularis. Elobjetivo de este trabajo es silenciar miR-71 en parásitos completos, en particular en tetratiridios(estadío larvario de M. vogae) e identificar sus genes blanco. Para llevar a cabo el silenciamientode miR-71, se utilizaron antimiRs, oligonucleótidos complementarios al miRNA que al unirse almismo bloquean su función. Previamente, se transfectaron tetratiridios con concentracionescrecientes de un oligonucleótido fluorescente y se observaron al microscopio confocal, paradeterminar las mejores condiciones. Luego se realizaron las transfecciones en 3 réplicasbiológicas, lográndose un 65% de silenciamiento determinado mediante RT-qPCR. Se indujo laestrobilización de parásitos silenciados y control, y se observó mayor capacidad deestrobilización en los primeros. Estos resultados sugieren que miR-71 estaría involucrado en elmantenimiento del estadío larval, regulando negativamente la expresión de genes necesariospara la estrobilización. La verificación experimental de genes blanco de miR-71, ya predichosmediante herramientas bioinformáticas, está en curso. Estos resultados proveen una estrategiapara estudiar la función de los miRNAs en parásitos cestodos y analizar su potencial comoblancos de drogas de enfermedades parasitarias desatendidas.