Función de Ssbp2 en el desarrollo del pronefros de Xenopus laevis.

CERVINO, AILEN S.; COLLODEL, MARIANO G.; LOPEZ, IVAN A.; CIRIO, MARIA CECILIA

Taller; V Taller de Biologia Cecular y del Desarrollo; 2022

El riñón cumple diversas funciones vitales tanto en la vida adulta como en la embrionaria. Durante el desarrollo de vertebrados se forman hasta tres sistemas renales de complejidad creciente: pronefros, mesonefros y metanefros. Los dos primeros están presentes en anamniotas; mientras que amniotas desarrollan los tres tipos. Mesonefros y metanefros dependen de la formación inicial del pronefros.El factor de transcripción Lhx1 regula la expresión de los genes blanco formando complejos multi-proteicos junto a la proteína Ldb1. La actividad de Lhx1, es esencial para el desarrollo del riñón, y su expresión marca el compromiso de las células del mesodermo intermedio hacia un destino renal. Sin embargo, son pocos los cofactores de Lhx1-Ldb1 identificados en la formación de este órgano. Empleando Xenopus como sistema modelo, realizamos ensayos de purificación por afinidad y espectroscopía de masa (TAP-MS/MS), obteniendo proteínas candidatas asociadas al complejo Lhx1-Ldb1 en una línea celular renal y en explantes embrionarios inducidos a destino renal. En ambos sistemas identificamos a Ssbp2 (single stranded DNA-binding protein 2). Esta familia de proteínas interactúa con Ldb1 promoviendo sus funciones en la regulación génica al estabilizar y prevenir su degradación.En este trabajo, investigamos la función de Ssbp2 en la organogénesis del pronefros. Mediante hibridación in situ analizamos el patrón de expresión del ARNm. Evaluamos el efecto de la ganancia de función inyectando el ARNm de ssbp2 y de la pérdida de función utilizando un oligonucleótido morfolino específico. Visualizando los efectos de estos tratamientos durante el desarrollo del pronefros con marcadores de distintos componentes del nefrón.En conjunto, los experimentos funcionales muestran la importancia de Ssbp2 en la morfogénesis del primer riñón embrionario de vertebrados. Nuestros resultados son evidencia de que la asociación de proteínas Ssbp con el complejo Lhx1-Ldb1 se encuentra conservada en la formación de diferentes estructuras embrionarias en vertebrados, mediando decisiones de destino celular e interacciones entre regiones promotoras y enhancers.