Desarrollo de 3 nuevos tests para el diagnóstico rápido de hemoparásitos que causan la babesiosis y anaplasmosis bovina basados en la tecnología de amplificación isotérmica mediada por bucles (LAMP)

VALENZANO, MAGALÍ NICOLE; GUILLEMI ELIANA CAROLINA; MONTENEGRO, VALERIA NOELY; TRANGONI MARCOS; BARBON GUSTAVO ; PÉREZ, AGUSTINA; ZIMMER PATRICIA; SARMIENTO, NÉSTOR FABIÁN; PERTILE CARLA; CARILLO CAROLINA; FARBER, MARISA DIANA; WILKOWSKY, SILVINA ELIZABETH

La Plata

Encuentro; XXXIV Reunión Anual SAP; 2023

Sociedad Argentina de Protozoología

Los parásitos Babesia bovis y Babesia bigemina, y la rickettsia Anaplasma marginale causan el síndrome conocido en Argentina como el Complejo Tristeza Bovina, una enfermedad anemizante que causa importantes pérdidas económicas al sector ganadero del norte de nuestro país. Actualmente el diagnóstico de casos agudos se realiza mediante microscopía o por PCR lo cual requiere de equipamiento adecuado y personal entrenado. Por estos motivos resulta fundamental disponer de una herramienta de diagnóstico molecular sencilla, rápida, sensible, con posibilidad de ser usada al pie del animal y dirigida especialmente para el manejo de los brotes en el campo.Este desarrollo apunta a simplificar la confirmación diagnóstica y disminuir los costos de tratamientos innecesarios a los productores de las zonas afectadas. En este trabajo desarrollamos 3 reacciones LAMP para la detección molecular de ADN de B. bovis, B. bigemina y A. marginale cuyo resultado positivo se evidencia a simple vista con el cambio de color de la reacción. Con este fin diseñamos primers que amplifican genes del apicoplasto de B. bovis y B. bigemina y el gen msp1b de A. marginale. En cuanto a su sensibilidad, las LAMP detectaron hasta una parasitemia de 0.01% en el caso de B. bovis y B. bigemina, y de 0.001% en el caso de A. marginale, las cuales están por debajo de las observadas en casos agudos. Además, todas las reacciones resultaron específicas para cada patógeno. Para la validación clínica las 3 pruebas se evaluaron en 165 muestras de los 3 hemoparásitos provenientes del NEA demostrando que cada esquema diseñado es capaz de detectar el 100% de los casos agudos evaluados. En conclusión, desarrollamos 3 tests de diagnóstico rápido con sensibilidad suficiente para la detección de casos agudos de “tristeza” y con la ventaja de su bajo requerimiento de equipos y su facilidad de interpretación los cuales podrán ser implementados para el diagnóstico a campo de la Tristeza bovina.