Celulas dendriticas deficientes en galectina-1 son refractarias al efecto tolerogenico inducido por tripomastigotes de Trypanosoma cruzi

PONCINI CV; ILARREGUI JM; BATALLA EI; RABINOVICH GA; GONZ¡¡Ì¢LEZ CAPPA SM

Congreso; IX Congreso Argentino de Protozoologia y Enfermedades Parasitarias; 2011

Sociedad Argentina de Protozoolog¡¡ìªa

Celulas dendriticas deficientes en galectina-1 son refractarias al efecto tolerogenico inducido por tripomastigotes de Trypanosoma cruzi Poncini CV, Ilarregui JM, Batalla EI, Rabinovich GA, Gonzalez Cappa SM. Previamente, demostramos que tripomastigotes de T. cruzi (Tp) vivos o muertos por calor modulan la activaci¨®n de c¨¦lulas dendr¨ªticas (CD) por LPS, induciendo un perfil tolerog¨¦nico independientemente de infecci¨®n. La superficie de T. cruzi se encuentra altamente glicosilada y son escasos los estudios que caracterizan el reconocimiento de dichos glicanos por el hu¨¦sped. Las galectinas (Gal) son una familia de lectinas que reconocen residuos ¦Â-galact¨®sidos, cruciales en la regulaci¨®n y homeostasis de la respuesta inmune. Recientemente, se ha descripto el rol inmunoregulador de Gal-1 asociado a la diferenciaci¨®n de CD tolerog¨¦nicas, y el incremento de Gal-1 en CD ante est¨ªmulos tolerog¨¦nicos. El prop¨®sito de este trabajo es analizar si la inducci¨®n de CD tolerog¨¦nicas por Tp in vitro involucra mecanismos dependientes de Gal-1 y analizar el papel de dichas CD as¨ª como el de Gal-1 end¨®gena en el curso de la infecci¨®n aguda experimental. Por citometr¨ªa de flujo, observamos que cierto porcentaje de Tp uni¨® Gal-1 in vitro (media ¡À ES: 5¡À1%). An¨¢lisis por western blot demostraron que el tratamiento de CD derivadas de m¨¦dula ¨®sea de ratones wild type (CDwt) con Tp (muertos por calor), estimul¨® la expresi¨®n Gal-1. Al caracterizar la producci¨®n de citoquinas por ELISA en CDwt o deficientes en Gal-1 (Lgals1-/-)  observamos que ambas producen IL-27, IL-12, IL-6 e IL-10 ante el est¨ªmulo de LPS¡ÀTp. Sin embargo, la presencia del par¨¢sito logr¨® disminuir la producci¨®n de IL-12p70 y aumentar la de IL-10 en forma significativa en CDwt (CDLPS vs CDLPS+Tp; p˂0,05). Al analizar la capacidad de dichas CD de inducir proliferaci¨®n en cultivos alog¨¦nicos, observamos que CDLgals1-/- son refractarias al efecto tolerog¨¦nico de Tp descripto para CDwt (p˂0,05). Coincidentemente, se encontr¨® menor producci¨®n de IFN-¦Ã en sobrenadantes de cultivo alog¨¦nico con CDwt en comparaci¨®n a CDLgals1-/- estimuladas en presencia de Tp (p˂0,05). Finalmente, en el modelo de infecci¨®n experimental (cepa alta virulencia RA), resultados preliminares demostraron que ratones machos Lgals1-/- presentan mayor susceptibilidad que los wt: menor sobrevida en el tiempo a distintas dosis letales y v¨ªas de infecci¨®n y mayor esplenomegalia. Los resultados sugieren que Gal-1 participar¨ªa de la inducci¨®n CD tolerog¨¦nicas por Tp in vitro. Futuros estudios permitir¨¢n caracterizar la relevancia de Gal-1 end¨®gena en los mecanismos de inmunomodulaci¨®n durante el curso de la infecci¨®n por T. cruzi.