Influencia de LAA (locus de adherencia y autoagregación) en la formación de biofilm de cepas Escherichia coli productor de Toxina Shiga.

VELEZ, MARIA VICTORIA; COLELLO, ROCÍO; ETCHEVERRIA ANALÍA I; PADOLA, NORA LIA

Tandil

Jornada; II Jornadas internas de Investigación y Posgrado; 2019

Facultad de Cs. Veterinarias

Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) es considerado un patógeno emergente transmitido por alimentos asociado a colitis hemorrágica (CH) y Síndrome Urémico Hemolítico (SUH). Dentro de STEC existe un grupo que coloniza y lesiona la mucosa intestinal debido a una isla de patogenicidad llamada Locus de borrado del enterocito (LEE). A partir de la presencia o ausencia de este locus se podría realizar una clasificación de STEC en LEE-positivas o LEE-negativas. Las cepas LEE-negativas no poseen los genes necesarios para producir lesión. Sin el locus LEE, las cepas deben adherirse al epitelio intestinal por otros mecanismos. Se ha determinado la existencia de una isla de patogenicidad denominada LAA que en ausencia de LEE, codifica genes que participan en la adhesión y autoagregación. Su marcador es el gen hes, que se encuentra en uno de los cuatro módulos que la componen y participaría en los mecanismos de patogenicidad. Por otra parte sabemos que un importante mecanismo de defensa expresado por la mayoría de las bacterias, es el biofilm, el cual le permite a STEC colonizar gran cantidad y diversidad de ambientes, con el riesgo de contaminar alimentos, por lo que lo consideramos un importante punto de estudio. El objetivo de este trabajo fue estudiar la capacidad de formar biofilm de cepas STEC LAA-positivas comparadas con cepas mutantes carentes de LAA y de hes. Se comparó en tres eventos independientes la formación de biofilm in vitro entre cepas STEC. Se trabajó con cepas autóctonas, y otras mutantes. El ensayo se realizó sobre matrices de poliestireno de 96 pocillos por triplicado. Las cepas se cultivaron en LB a 37°C, 48h de incubación. Se realizaron clasificaciones según su capacidad de formar biofilm en no formadoras, débiles, moderadas, o fuerte según DO. Se pudo observar que todas las cepas fueron fuerte formadoras de biofilm. Sin embargo, la cepa que más formación presentó fue una autóctona. Todas las cepas que portaron hes se clasificaron como moderadas y fuertes formadoras de biofilm. Se conoce que para adaptarse a la vida del biofilm, una bacteria sufre cambios activando genes que codifican proteínas estructurales y enzimáticas. Estos genes y proteínas son los que explican la fijación y la resistencia de las bacterias que conforman el biofilm. A través de los resultados obtenidos se considera que hes podría ser uno de estos genes.