LAS VESÍCULAS EXTRACELULARES DE LACTICASEIBACILLUS CASEI BL23 PRESENTAN CAPACIDAD ADHESIVA A LA MUCINA INTESTINAL

DOMINGUEZ RUBIO ANA PAULA; D'ANTONI CL; MARIANA PIURI; OSCAR PEREZ

Jornada; V JIF Jornadas de Investigadores e Investigadoras en Formación en CyT; 2023

Se ha propuesto que las vesículas extracelulares (VE) bacterianas intervienen en la señalización entre las bacterias probióticas y su hospedador. Estas son de tamaño nanométrico y están formadas por una bicapa lipídica con componentes citosólicos como ADN, ARN y proteínas. Resultados de analisis porteómicos via LC-MS/MS de VEs de L. casei BL23 mostraron un total de 103 proteínas. El contenido de las VEs incluyó proteínas involucradas en la adhesión a mucinas como LCABL_31160, LCABL_00230 (p40) y LCABL_02770 (p75)1. En este marco, el objetivo de este estudio fue estudiar si las las EVs de L. casei BL23 tienen la capacidad de adhesión al moco gastrointestinal, ya que podría ser el primer paso en la interacción física con el hospedador.Para corroborarlo de manera in vitro, se estudió la adhesión de las VEs de L. casei BL23 a la mucina tipo III de estómago porcino. Se realizó el coating de mucina de 10 mg/ml en placa de ELISA2. Se purificaron las VEs, luego fueron teñidas con CFSE (ex498/em517)1 y se preparararon diluciones seriadas (100%, 75%, 50%, 35% Y 0%). Se incubaron las EVs con la mucina por 2 hs a 37ºC y luego de sucesivos lavados se procedió a extraer las EVs adheridas a la mucina para medir la fluorescencia a 520nm. Mediante esta metodología se demostó que las VEs de L. casei BL23 tienen la capacidad de adherirse a la mucina del tracto gastrointestinal: a mayor cantidad de VEs dosificadas, mayor cantidad de VEs permanecieron adheridas a las mucinas (Anova de 1 factor, n=3, P