PREPARACIÓN DE UN NANOSENSOR PARA EL ESTUDIO DEL EFECTO CORONA

QUIPILDOR, ROCÍO; KIKOT, PAMELA ALEJANDRA; FLORES, CONSTANZA; ACHILLI, ESTEFANÍA; GRASSELLI, MARIANO

QUILMES

Jornada; V Jornadas de Investigadores en Formación en CyT UNQ; 2023

UNIVERSIDAD NACIONAL DE QUILMES

Las nanopartículas inorgánicas tienen un gran potencial para ser utilizadas en Nanomedicina, sin embargo, por problemas de biocompatibilidad y efectividad no se ha concretado su aplicación con éxito. La principal barrera a la que se enfrentan al entrar en contacto con los medios biológicos es el “Efecto Corona”, el cual se refiere al recubrimiento de las nanopartículas inorgánicas y poliméricas con las proteínas séricas, que afecta su transporte y efectividad. El objetivo del presente trabajo es la preparación de nanopartículas de oro (AuNPs) recubiertas por una monocapa de la proteína verde fluorescente recombinante (GFP-Cys2) (1) como nanosensor para el estudio del Efecto Corona. El mismo se basa en la capacidad de las AuNPs de actuar como un extintor proximal del cromóforo de la GFP, producido por el efecto de transferencia de energía de superficie nanometal (NSET). La obtención de AuNPs se realizó según el método de Frens (2), para luego recubrirlas con una solución proteica 0,30 mM de GFP-Cys2. El nanosensor purificado por centrifugación fue caracterizado por DLS (Dynamic Light Scattering), espectroscopía UV-visible y fluorescencia. Se obtuvieron AuNPs/GFP-Cys2 de 48 +/- 3 nm con una señal plasmónica a 525 nm, que demostraron ser estables en presencia de NaCl. Mediante Espectroscopía Infrarroja Transformada de Fourier (FTIR) y la disolución de las AuNPs con tiosulfato de sodio se confirmó la presencia de GFP sobre la superficie de las mismas. Se estudió la interacción de diferentes compuestos tiolados y proteínas con el nanosensor, a partir del desplazamiento de la GFP-Cys2 adsorbida a la superficie de las nanopartículas, lo que reveló un aumento de la fluorescencia. Finalmente, el sistema podría ser de gran utilidad para el estudio del intercambio de proteínas que ocurre en el efecto corona sobre las AuNPs con potencial uso en Nanomedicina.1. Kikot, P., Polat, A., Achilli, E., Fernandez Lahore, M., Grasselli, M. Journal of molecular recognition, 27(2014), 659-6682. Frens G., 1973. Nature Physical Science, 241(105), 20-22