El canal policistina-2 (TRPP2) reconstituido en condiciones de transporte de alto calcio general oscilaciones eléctricas consistentes con un modelo "excitable".

IF VELÁZQUEZ; MR CANTERO; HF CANTIELLO.

Congreso; Reunión anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2014

La regulación por Ca2+ de canales iónicos permeables al mismo representa un mecanismo importante en el control de toda función celular. La policistina-2 (PC2, TRPP2), un miembro de la superfamilia de los TRP (Transient Receptor Potential), es un canal catiónico no selectivo de alta conductancia, con permeabilidad al Ca2+. Recientemente observamos (Cantero & Cantiello, Biophys J, 2013) que la PC2 obtenida por traducción in vitro (PC2iv) es totalmente insensible al Ca2+. Dada la importancia del Ca2+ sobre la función de la PC2, en el presente estudio evaluamos el transporte de Ca2+, en condiciones de altas concentraciones del ión y su posible efecto regulador sobre la actividad de PC2iv. El canal se estudió en un sistema de reconstitución de bicapas lipídicas con composiciones fosfatidilcolina:fosfatidiletanolamina (PC:PE) 3:7 y 7:3. Las corrientes de PC2iv se obtuvieron en gradientes químicos (cis/trans, en mM) 100/10 Ca2+, o 150/10, K+/Ca2+. Se observaron corrientes de canal único en 11/45 en PC:PE 7:3, y 16/120 en PC:PE 3:7. En PC:PE 3:7, también fueron observadas oscilaciones de corriente, cuya amplitud y frecuencia dependió del voltaje aplicado, el gradiente impuesto, y de la presencia de alto Ca2+. Este fenómeno eléctrico generado con un solo tipo de canal iónico, y en ausencia de otras proteínas reguladoras, extrínsecas al canal, requiere un modelo de retroalimentación, donde la cinética de transporte del canal, es controlada por el Ca2+ transportado. La dependencia al voltaje sería mediante un acoplamiento del ión a sitios intracelulares del canal, sólo accesible por el ión transportado que controlan su probabilidad de estado abierto. Dado que la presencia de respuestas eléctricas oscilatorias en diversos modelos celulares ?no excitables?, estaría asociada a oscilaciones en el Ca2+ intracelular, los presentes datos sugieren un modelo minimalista donde la sensibilidad al voltaje del canal sería conferido por cambios conformacionales Ca2+ dependientes inducidos por el ión transportado, que afecta la cinética del canal.