Avances en el estudio de microRNAs en parásitos cestodos

GRECCO, ANDRÉS; MACCHIAROLI, NATALIA; CUCHER, MARCELA; ROSENZVIT, MARA

Buenos Aires

Congreso; Primera Jornada Itinerante de Epigenética; 2022

Universidad Nacional de San Martín (UNSAM)

Mesocestoides vogae es un parásito platelminto validado como modelo de laboratorio de la clase Cestoda. Esta clase incluye especies como Echinococcus granulosus y E. multilocularis que causan enfermedades desatendidas como equinococosis. Los microRNAs (miRNAs) son pequeños ARNs no codificantes que regulan la expresión génica a nivel post-transcripcional reconociendo sitios en el 3’UTR de sus ARNm blanco e inhibiendo su expresión. miR-71 es un miRNA altamente expresado en parásitos cestodos, ausente en vertebrados y con genes blanco esenciales para la biología parasitaria, por lo que representa un potencial blanco terapéutico selectivo. Previamente se silenció miR-71 en cultivos celulares primarios de E. multilocularis. El objetivo de este trabajo es silenciar miR-71 en parásitos completos, en particular en tetratiridios (estadío larvario de M. vogae) e identificar sus genes blanco. Para llevar a cabo el silenciamiento de miR-71, se utilizaron antimiRs, oligonucleótidos complementarios al miRNA que al unirse al mismo bloquean su función. Previamente, se transfectaron tetratiridios con concentraciones crecientes de un oligonucleótido fluorescente y se observaron al microscopio confocal, para determinar las mejores condiciones. Luego se realizaron las transfecciones en 3 réplicas biológicas, lográndose un 65% de silenciamiento determinado mediante RT-qPCR. Se indujo la estrobilización de parásitos silenciados y control, y se observó mayor capacidad de estrobilización en los primeros. Estos resultados sugieren que miR-71 estaría involucrado en el mantenimiento del estadío larval, regulando negativamente la expresión de genes necesarios para la estrobilización. La verificación experimental de genes blanco de miR-71, ya predichos mediante herramientas bioinformáticas, está en curso. Estos resultados proveen una estrategia para estudiar la función de los miRNAs en parásitos cestodos y analizar su potencial como blancos de drogas de enfermedades parasitarias desatendidas.