Aislamiento y caracterización de un mutante sensible a la acidez de Rhizobium sp. LPU83

MARTINI M. C.; SALTO I.; TORRES TEJERIZO G. A.; GIUSTI M. A.; LOZANO M. J.; PISTORIO M.; LAGARES A.; DEL PAPA M. F.

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiologia. Asociación Argentina de Microbiología; 2010

Para identificar genes asociados con la tolerancia a la acidez, se realizó una mutagénesis generalizada sobre la cepa LPU83 con el transposón Tn5. De los mutantes generados, identificamos uno que se vio disminuido en su capacidad de crecer a pH 5.0. Mediante clonado de la inserción, secuenciamiento y comparación con bases de datos se encontró que dicho mutante contenía interrumpido el extremo carboxilo terminal de un marco de lectura abierto (ORF1) situado río arriba de un gen homólogo a ubiH (codifica para una hidroxilasa interviniente en la biosíntesis de ubiquinona). Considerando el posible carácter polar de la mutación, se construyeron dos mutantes sitio específicos para los genes ORF1 y ubiH. Ambos mutantes desarrollaron en medio mínimo en condiciones ácidas una menor velocidad especifica de crecimiento. También presentaron una competitividad para la nodulación nula frente a la cepa salvaje LPU83, tanto en M. sativa como en P. vulgaris. Además, en los dos mutantes observamos una tolerancia disminuida a la presencia de ascorbato (condiciones reductoras) y a concentraciones elevadas de Zn+2.