SILENCIAMIENTO DEL GEN RELOJ PERIOD EN Triatoma infestans Klug: EFECTO EN SU PERFIL DE EXPRESIÓN DIARIO

LOURDES EUGENIA CÓRDOBA; BEATRIZ ALICIA GARCÍA; STROPPPA MARÍA MERCEDES

Congreso; LI Congreso Argentino de Genética; 2023

El vector de la enfermedad de Chagas Triatoma infestans muestra ritmos diarios controlados porlos genes del reloj biológico. La interferencia por ARN (ARNi) es un mecanismo desilenciamiento génico que interrumpe la expresión de genes específicos. Para el silenciamientodel gen reloj period (per) se utilizaron protocolos de ARNi con diferentes esquemas dealimentación y se analizó el efecto del silenciamiento en su perfil de expresión diario en tejidonervioso de T. infestans. Los ARNi del gen per y del gen control β-Lactamasa (β-Lac) seinyectaron en ejemplares adultos y se realizaron disecciones cada 6 hs durante un período de 24hs. La hora del día fue expresada en Zeitgeber Time (ZT). En cada grupo se determinó laexpresión del gen per mediante la técnica de Retrotranscripción y PCR en Tiempo Real (RT-qPCR). El silenciamiento del gen per en machos y hembras de T. infestans mostró unadisminución significativa en la expresión transcripcional en el grupo de insectos inyectados conel ARNi del gen per con respecto a los niveles hallados en los grupos control (no inyectados einyectados con el ARNi para el gen β-Lac). Los esquemas de alimentación utilizados en losprotocolos no afectaron de forma significativa el nivel de interferencia. Por otra parte, elsilenciamiento del gen per redujo su expresión en todos los ZT analizados y no se observaron lasvariaciones diarias características en la expresión a nivel transcripcional que presenta este genreloj. Los resultados obtenidos permitieron establecer que el silenciamiento del gen per fueefectivo tanto en machos como en hembras y no se ve afectado por los esquemas de alimentaciónutilizados en los protocolos de interferencia. Por otra parte el silenciamiento del gen per afectó elperfil de expresión del gen reduciendo a la mitad su expresión en todos los ZT analizados.