Uso de embriones de Xenopus para la detección de compuestos bioactivos de plantas

GABRIELA C. SOMAINI; MANUEL J. AYBAR; NANCY R. VERA; CELESTE TRÍBULO

San Miguel de Tucumán

Congreso; IV Jornadas Nacionales de Plantas medicinales nativas y VIII Jornadas Nacionales de Plantas aromáticas nativas y sus aceites esenciales; 2024

Comité Organizador Cientifico

Los embriones del anfibio Xenopus constituyen un sistema eficiente para determinar el potencial de compuestos naturales como moduladores de diferentes vías de señalización celular mediante ensayos basados en el análisis de fenotipos morfológicos y moleculares. La vía de señalización wnt/b-catenina es esencial para el desarrollo del eje dorsoventral de Xenopus. Cualquier tratamiento que interrumpa la vía da como resultado la formación anormal del eje produciendo fenotipos muy característicos y fáciles de reproducir experimentalmente. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de extractos acuosos de frutos de Ziziphus mistol (EAZm) y Geoffroea decorticans (EAGd) sobre embriones de Xenopus. Para ello, se incubaron embriones con los extractos desde estadio 3 hasta 10,5 y luego se dejaron desarrollar hasta estadio 32. Concentraciones de 2, 5 y 20 mg/ml de EAZm produjeron un desarrollo anormal en un 14%, 33% y 50% de los embriones, respectivamente. Asimismo, con 10, 20 y 30 mg/ml de EAGd se obtuvo un desarrollo anormal en un 10%, 68% y 84% de los embriones, respectivamente. En ambos casos se observaron fenotipos ventralizados que se caracterizan por la pérdida o reducción de las estructuras dorsoanteriores (DA). Por otra parte, se activó la vía wnt/β-catenina empleando LiCl, que produce fenotipos DA. Para ello, los embriones se incubaron con los extractos hasta estadio 6,se trataron con LiCl durante 10 minutos, se incubaron nuevamente con los extractos hasta estadio 10,5 y se dejaron desarrollar hasta el 32. Los fenotipos observados se clasificaron según el índice DA (IDA). Un IDA mayor a 5 indica dorsoanteriorización. El IDA promedio para los embriones tratados con LiCl fue de 7,66 mientras que para los embriones tratados además con EAZm fue de 5,86 y con EAGd fue de 5,39, indicando que los extractos revierten los fenotipos DA producidos por el tratamiento con LiCl. Estos resultados muestran que ambos extractos producen fenotiposcompatibles con la inhibición de la vía wnt/b-catenina. Así, el empleo de ensayos basados en el análisis de fenotipos constituyen una metodología rápida y eficiente para la búsqueda de nuevas moléculas bioactivas y sus posibles blancos de acción.