Caracterización del calcio basal en células de epitelio mamario humano normales y tumorales en respuesta a estímulos mecánicos

E A REBECA PALACIOS; SILVINA PONCE DAWSON; LIA I PIETRASANTA; LORENA SIGAUT

Ciudad de Buenos Aires

Jornada; V JORNADAS DE JÓVENES BIONANOCIENTÍFICXS; 2023

JÓVENES BIONANOCIENTÍFICXS

Las señales celulares de calcio son ubicuas y están involucradas en numerosos procesos fisiológicosen diversos tipos celulares. La concentración de calcio libre citosólica impacta en distintas cascadasde señalización1. El presente trabajo se enfoca en el estudio de las señales de calcio (Ca2+) enrespuesta a estímulos mecánicos y variaciones de las propiedades químicas/físicas delmicroentorno, a través de experimentos de microscopía confocal. Como sistema de estudioempleamos células de epitelio mamario humano normales (MCF10A) y tumorales (MCF-7), que encondiciones fisiológicas normales tienen que responder a estímulos mecánicos en especial durantelos períodos de embarazo y lactancia2. El cambio de calcio basal se visualiza utilizando el sensorfluorescente Fluo 4. Este es un fluoróforo permeable a membrana plasmática que aumenta suintensidad de fluorescencia al ligar Ca2+. En un primer lugar se analizó la respuesta del Ca2+citosólico a modificaciones de la concentración del Ca2+ extracelular. Por otro lado, los diferentesestímulos mecánicos se generaron manipulando microcapilares de vidrio modificados con la ayudade un micromanipulador: se realizaron estímulos de herida sobre monocapas de células cultivadassobre vidrio, además se ejercieron estímulos de compresión en células cultivadas sobre hidrogelesde poliacrilamida. Como resultado, se logró caracterizar el cambio del calcio basal en célulasepiteliales humanas normales y tumorales en respuesta a la concentración de calcio extracelular.Además, se pudo detectar y caracterizar la onda de calcio generada en la monocapa cuantificandosu velocidad y alcance en respuesta a los diferentes estímulos mecánicos. Estos resultados nospermiten contrastar las señales de calcio generadas por células tumorales y normales en respuestaa diferentes estímulos de su entorno.REFERENCIAS[1] Pratt SJP, Hernández-Ochoa E, Martin SS. Calcium signaling: breast cancer´s approach tomanipulation of cellular circuitry. Biophys Rev. 2020;12(6):1343-1359.[2] Ja Hye Myung, Khyati A. Gajjar, Ryan M. Pearson, Cari A. Launiere, David T. Eddington, andSeungpyo Hong, Anal Chem. 2011 Feb 1; 83(3): 1078–1083