Actividad antiviral e inmunomoduladora de la escina y del extracto de semillas de Aesculus hipposcatanum L. frente a los coronavirus

PEÑARANDA FIGUEREDO, FREDDY ARMANDO; VICENTE, JOSEFINA; BARQUERO, ANDREA ALEJANDRA; BUENO, CARLOS ALBERTO

Vaquerías, Córdoba

Jornada; XLIII Reunión Científica Anual, Sociedad Argentina de Virología; 2023

Sociedad Argentina de Virología

Si bien la vacunación contra el SARS-CoV-2 ha demostrado ser exitosa, el SARS-CoV-2 todavía representa una amenaza importante para los pacientes de riesgo de enfermedad severa, como los inmunosuprimidos o adultos mayores. Por otro lado, es de esperar la emergencia de nuevas poblaciones virales pandémicas en un futuro no muy lejano. Por lo tanto, además de las necesidades inmediatas de tratamientos antivirales, es vital que se desarrollen antivirales deamplio espectro para estar preparados frente a una nueva pandemia. La Escina, un terpenoide extraído de semillas de Aesculus hippocastanum L. (Castaño de Indias), y el extracto del Castaño de Indias (CI), están aprobadas por la ANMAT para el tratamiento de la insuficiencia venosa crónica, dadas sus propiedades antiinflamatorias. Nosotros hemos previamente reportado que la Escina y el CI presentan actividad antiviral de amplio espectro e inmunomoduladora frente a infecciones virales, tanto in vitro como in vivo. Asimismo, se ha reportado que otros compuestos con estructuras similares a la Escina presentan actividad antiviral contra SARS-CoV OBJETIVO: Evaluar la actividad antiviral de Escina y CI contra el coronavirus canino (CCV) y SARS-CoV-2La citotoxicidad de los compuestos en las células calu-3 (células epiteliales de adenocarcinoma de pulmón humanas), CRFK (células epiteliales de riñón de gato) y J774A.1 (macrófagos murinos) fue evaluada por el método de MTT, y la actividad antiviral por un ensayo de inhibición del rendimiento viral. La expresión de la proteína viral spike (S) fue analizada por Inmunofluorescencia Indirecta (IFI). La producción de citoquinas fue evaluada por ELISA, y la actividad transcripcional de NF-kappaB en células transfectadas con un plásmido reportero de NF-kappaB-luciferasa. En las células calu-3 y CRFK infectadas con SARS-CoV-2 y CCV, respectivamente, y tratadas con Escina y CI antes y después de la infección, se observó una reducción de los títulos virales dependiente de la concentración, en ausencia de toxicidad. A través de ensayos de adición y remoción a distintos tiempos, ubicamos la acción inhibitoria durante las etapas tempranas de infección, en particular durante la internalización viral. Asimismo, se detectó una reducción de la expresión de la proteína viral S en las células calu-3 infectadas con SARS-CoV-2 y tratadas con Escina y CI respecto de las células sin tratar. Por otro lado, en células J774A.1 infectadas con CCV y tratadas con Escina y CI, se observó una disminución significativa de la activación de NF-kappaB y de la producción de las citoquinas inflamatorias TNF e IL-6, en comparación con las células infectadas sin tratar.La Escina y el CI presentan actividad antiviral en etapas tempranas de la infección frente a los coronavirus, y modulan la activación transcripcional de NF-kappaB y la producción de citoquinas inflamatorias en células infectadas.