Expresión diferencial de un gen clave para la metabolización de micronutrientes donantes de metilo en células del oviducto bovino

MARIO EXEQUIEL CÉSPEDES; ELINA VANESA GARCÍA; PAULA GOMEZ; ANTONIO DANIEL BARRERA

Salta

Jornada; III Encuentro de la Red Internacional Universitaria para el Desarrollo de la Investigación y las Publicaciones Científicas (ERII) y XVII Jornadas de Investigación Desarrollo e Innovación de la Universidad Católica de Salta; 2023

Universidad Católica de Salta

La comunicación materno-embrionaria tiene un rol crucial para el establecimiento y mantenimiento de la preñez en mamíferos. Durante la embriogénesis temprana, este intrigante diálogo comienza en la ventana de tiempo en la cual el embrión transita por el oviducto. Por lo tanto, diferentes moléculas bioactivas presentes en el microambiente oviductal y derivadas de la nutrición materna pueden intervenir en esta comunicación especializada y contribuir a la preparación del ambiente óptimo para el inicio del desarrollo embrionario. El folato y la vitamina B12 son micronutrientes necesarios para la maquinaria que regula la epigenética y la expresión génica por lo que pueden tener un rol importante en la modulación de señales entre el oviducto y el embrión. Si bien se sabe que las células epiteliales del oviducto bovino (BOECs) expresan receptores y transportadores para estos micronutrientes, aún resta determinar si estas células oviductales cuentan con los componentes moleculares del metabolismo celular en el que participan. La actividad de la enzima metionina sintasa (MTR) es dependiente de folato y B12, y esta vincula el ciclo del folato con el de la metionina, garantizando la disponibilidad de grupos metilo para la remetilación de homocisteína a metionina y la síntesis de S-adenosilmetionina (SAM) para las marcas epigenéticas de metilación, Además, se han asociado algunas mutaciones en su gen con problemas reproductivos de infertilidad o subfertilidad tanto en animales domésticos como en humanos. Basado en lo descripto, el objetivo de este trabajo fue analizar los niveles de expresión del gen MTR en BOECs derivadas de diferentes regiones anatómicas y etapas del ciclo estral. Para ello se procedió a la obtención de tractos reproductivos de hembras bovinas faenadas en frigoríficos locales y a su transporte en frío hasta el laboratorio. La etapa del ciclo estral se determinó mediante evaluación de la morfología ovárica y los oviductos ipsilaterales al ovario activo se clasificaron en tres grupos: a) estadio preovulatorio (Pre-ov), b) estadio postovulatorio (Post-ov) y c) estadio luteal medio (Mid-L). Luego, se procedió a obtener las BOECs mediante presión mecánica de la región del ámpula y del istmo por separado y posteriormente se llevó a cabo la extracción y cuantificación del ARN total, la síntesis de ADNc y la cuantificación relativa de la expresión génica mediante qPCR empleando el termociclador ABI QuantStudio 5. La expresión de MTR en las diferentes muestras se relativizó al gen de control endógeno ACTB. Se determinaron niveles transcripcionales de MTR más elevados en la región del istmo durante la etapa Pre-ov respecto a la región del ámpula (p