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CAV047CLONADO DE EPITOPES CANDIDATOS PARA EL DESARROLLO DE TECNOLOGÍA VACUNAL CONTRA VIRUS DE LA ANEMIA INFECCIOSA DEL SALMONFederico Martin Villarreal (Instituto de Ciencia y Tecnología Cesar Milstein-CONICET), Lorena Analia Boado (Instituto de Ciencia y Tecnología Cesar Milstein-CONICET), Jose Manuel Gomez (Instituto de Ciencia y Tecnología Cesar Milstein-CONICET), Thelma Verónica Poggio (Instituto de Ciencia y Tecnología Cesar Milstein-CONICET),Adrian Vojnov (Instituto de Ciencia y Tecnología Cesar Milstein-CONICET)INTRODUCCION y OBJETIVOS: La vacunación de peces es una de las principales medidas de control y prevención de enfermedades infecciosas en acuicultura.En 2007, las debilidades en la normativa y las fallas en la vigilancia de la actividad favorecieron la aparición del ortomixovirus de la anemia infecciosa del salmon (ISAV) responsable de la mortalidad, la reducción de la tasa de crecimiento y la calidad de los peces con la expansión de los cultivos en Chile, segundo productor mundial de salmones.La entrada del virus a la célula requiere la interacción de la hemoaglutinina-esterasa (HE) del virión y las glicoproteínas de fusión.Se describe a la HE como el principal target para el diseño de vacunas experimentales a subunidades contra ISAV generando respuesta humoral y alto grado de protección.Planteamos un método de inmunización activa de peces que estimule los mecanismos de inmunidad innatos y adaptativos sistémico/mucosales, induciendo una mejora en los parámetros productivos.Proponemos el uso de un prototipo vacunal basado en el sistema Baculovirus/células de insecto con la posibilidad de expresar multiples ?cassettes? con los genes de interés y su ensamblado como virus like particles (VLPs) mediante la proteína M1 de influenza incorporando en su superficie las proteínas candidatas de ISAV.METODOLOGIA: Ante la imposibilidad de contar con material biológico se seleccionaron secuencias consenso de HE a través del software de predicción de epitopes IEDB Analysis Resource y se optimizo la síntesis de un fragmento para su expresión en pfast-Bac1 en el sistema Bac to Bac.RESULTADOS y CONCLUSIONES: Según el tamaño de los epitopes y el score que el software analiza, seleccionamos 17 candidatos.Un fragmento sintético de 1173 nt homologo con más de 100 HE-ISAV fue clonado exitosamente en el vector de expresión y su secuencia corroborada para el ensamblado como VLPs a fin de poder evaluar su potencial antigénico y de protección en los salmónidos vacunados.

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