Cysteine peptidases present in the latex of Carica quercifolia (St.Hil.) Hieron. (Caricaceae)

TORRES M.J., LLERENA SUSTER C.R., ROIC L., LÓPEZ L.M.I. Y NATALUCCI C.L

Rosario

Jornada; XXX Jornadas Argentinas de Botánica; 2005

Sociedad Argentina de Botanica

Frutos de Carica quercifolia  fueron recolectados en diciembre de 2004 en la sierra de Guasayán (distrito serrano del parque chaqueño), provincia de Santiago del Estero, y remitidos inmediatamente al LIPROVE. El látex fue obtenido practicando incisiones superficiales y recibido en buffer cítrico-citrato 0,1M de pH 5,6 conteniendo EDTA 5mM. La preparación fue centrifugada a 11500g durante 20 min obteniéndose un sobrenadante límpido (extracto crudo). Dicho extracto fue caracterizado por SDS-PAGE e isoelectroenfoque-zimograma revelando la presencia de varias fracciones proteicas básicas con alta actividad peptidásica y otras fracciones ácidas no activas. El perfil de pH mostró que la actividad se manifiesta en un amplio rango de pH (más del 80% de actividad máxima entre pH 6,85 y 9,1). La actividad enzimática fue inhibida por E64 y ácido iodoacético, pero no fue afectada por 1-10 fenantrolina, pepstatina ni PMFS, demostrando que estas peptidasas son cisteínicas. El extracto crudo fue purificado por FPLC utilizando un intercambiador catiónico (CM-Sepharosa FF) y buffer Tris-HCl 50 mM de pH 7,5.