EFECTO CITOPROTECTOR DE LAS ENZIMAS ANTIOXIDANTES GSTA2 Y NQO1 REGULADAS A TRAVES DE LA VIA NRF2 DURANTE LA NEFROPATIA OBSTRUCTIVA NEONATAL

RINALDI TOSI MARTÍN; BOCANEGRA VICTORIA; MANUCHA WALTER; VALLES PATRICIA

Congreso; XXXI Reunión anual científica del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial (CAHTA). “Dr. Eduardo Brawn Menendez”. Sociedad Argentina de Cardiología.; 2010

La nefropatía obstructiva congénita es la causa más frecuente de fallo renal en neonatos. El estrés oxidativo y la isquemia producida contribuyen a la generación de especies reactivas del oxígeno (ROS) que constiuyen un estímulo a la injuria renal e inducción de la apoptosis. Un mecanismo por el cual las célula pueden adaptarse al estrés oxidativo es a través de la via de Nr2-ARE encargada de la regulación positiva de genes antioxidantes responsables amortiguar las ROS. En este trabajo evaluamos la activación de la vía de NRF2, directamente mediante la expresión nuclear de Nrf2 y citosólica de su inhibidor Keap1 por estudios de western blot; e indirectamente a través de las enzimas antioxidantes Glutation-S-transferasa (GSTA2) y NADPH: quinona oxido reductasa (NQO1) por estudios de RT-PCR. Utilizamos un modelo in vivo de obstrucción ureteral unilateral (OUU) neonatal de ratas Wistar de 48 hs de vida separadas en 2 lotes: Control sin obstrucción (n=4) y Experimental (n=6) las cuales fueron sometidas a obstrucción mecánica del uréter izquierdo durante 5, 7, 10 y 14 días. Luego fueron nefrectomizadas y procesadas muestras de corteza de riñones controles (C), obstruidos (CO) y contralaterales (CCL). Los resultados demostraron: incremento significativo en la expresión nuclear de Nrf2 CO y CCL vs CC en día 7 (p<0.001) y en día 14 CCL vs CC (p<0.001), esto se correlacionó con la disminución de la actividad de NADPH oxidasa, disminución citosólica del inhibidor Keap1 de 7 días de CO vs CC (p<0.01) y el aumento significativo en día 14 de CO vs CC (p<0.001). La expresión enzimática por RT-PCR mostró incremento de la actividad de GSTA2 a los 5 y 7 días en CO y CCL vs de CC (p<0.001), esto es consecuente con el incremento de Nrf2 en fracción nuclear a igual tiempo. En el caso de la enzima NQO1 demostramos incremento de esta enzima a los 7 y 10 días en CO; y a 14 días en CCL vs CC (p<0.05) con una paralela disminución de la enzima en CO en día 14 vs CO de día 7 y 10 (p<0.001). Estos resultados sugieren que: tanto GSTA2 como NQO1, posen activa participación en el balance de estrés oxidativo celular principalmente a día 5 y 7, consecuencia de la patología obstructiva, tanto en CO como en CCL, lo que claramente demuestra la participación de la vía Nrf2-ARE, en los mecanismos compensatorios de restitución del bisbalance oxidativo. Se observó que la protección antioxidante se mantiene en CCL al día 14 postobstrucción como mecanismo compensatorio frente al estrés celular sufrido por el riñón contralateral.